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文檔簡介
1、目的:
觀察壯藥扶芳藤對缺氧/復(fù)氧(H/R)損傷后人心內(nèi)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUMCE)ET-1和NO的影響。
方法:
采用人工體外傳代培養(yǎng)人心內(nèi)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUMCE),將培養(yǎng)至第三代的HUMCE接種到用預(yù)先純氮氣飽和10min的DMEM培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,并充入純氮氣排除培養(yǎng)瓶中的空氣,密封后置于37℃、CO2培養(yǎng)箱中2h后,換新鮮DMEM培養(yǎng)基,并重新置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2h,建立HU
2、MCE的缺氧/復(fù)氧模型;實驗隨機(jī)分為:正常對照組和造模組(扶芳藤組、卡托普利組、模型對照組)。采用藥物血清方法,制備含藥大鼠血清對傳代的HUMCE進(jìn)行培養(yǎng)干預(yù)。硝酸還原酶法檢測各組細(xì)胞上清液中一氧化氮(NO);采用蛋白印跡法(Western blot)檢測各組細(xì)胞的內(nèi)皮素-1(ET-1)蛋白水平。
結(jié)果:
與模型對照組比較,扶芳藤組、卡托普利組、正常組ET-1的蛋白水平顯著降低(P<0.05),NO分泌顯著增加(P<
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