TRIM59和COMMD9促進非小細胞肺癌增殖和遷移的分子機制研究.pdf

1、分類號：密級：UDC：學號：355628813020南昌大學博士研究生學位論文TRIM59和COMMD9促進非小細胞肺癌增殖和遷促進非小細胞肺癌增殖和遷移的移的分子機制研究分子機制研究TRIM59COMMD9promotesproliferationmigrationinnonsmallcelllungcancer詹偉華培養(yǎng)單位（院、系）：生命科學學院指導教師姓名、職稱：王建斌教授申請學位的學科門類：理學專業(yè)領(lǐng)域名稱：生物學論文答辯日期

2、：2016年12月答辯委員會主席：評閱人：2016年12月12日摘要I摘要第一部分第一部分TRIM59促進非小細胞肺癌增殖和遷移促進非小細胞肺癌增殖和遷移研究目的研究目的：TRIM家族是一類在炎癥、免疫、抗病毒和癌癥發(fā)生發(fā)展過程中有重要作用超家族蛋白。作為TRIM家族的一員，之前有文獻報道TRIM59通過泛素化p53促進胃癌的發(fā)生發(fā)展，但是TRIM59在非小細胞肺癌（NSCLC）中的生理學功能和作用機制并不清楚。本課題通過QPCR方法，

3、得到TRIM蛋白家族成員在非小細胞肺癌中的mRNA表達情況。進一步探討TRIM59對非小細胞肺癌細胞生長、遷移和細胞周期的影響及其作用機制。研究方法研究方法：1、用QPCR方法篩選4株非小細胞肺癌細胞（H1299，A549，SPCA1和H292）相對于正常人類支氣管上皮細胞（HBE）中差異表達的TRIM基因。2、在蛋白水平上驗證各株細胞中TRIM59表達情況，并且檢測其在14種人類正常組織中的表達情況。3、在轉(zhuǎn)染TRIM59特異性siR

4、NA情況下，通過飽和密度實驗、低血清實驗、克隆集落形成實驗、劃痕實驗、Transwell實驗、流式細胞術(shù)和免疫熒光實驗，檢測干擾TRIM59表達對非小細胞肺癌細胞生長、遷移和細胞周期的影響。4、降低TRIM59表達水平，然后進行QPCR實驗，免疫蛋白印跡實驗，檢測細胞周期蛋白和p53蛋白表達情況。研究結(jié)果研究結(jié)果：1、相比于HBE細胞，在4株NSCLC細胞中TRIM3、TRIM7、TRIM14、TRIM16、TRIM21、TRIM22、

5、TRIM29、TRIM59、TRIM66和TRIM70高表達，TRIM4、TRIM9、TRIM36、TRIM46、TRIM54、TRIM67和TRIM76低表達。而TRIM17、TRIM40、TRIM42、TRIM43、TRIM48、TRIM49、TRIM50、TRIM51、TRIM60、TRIM63、TRIM64和TRIM77在NSCLC細胞和HBE細胞中未檢測到。2、相比于HBE細胞，TRIM59蛋白在4株NSCLC細胞中高表達。T