IFN-γ的檢測及其在潛伏性結(jié)核診斷中的應(yīng)用.pdf

1、幾百年來，結(jié)核病一直困擾著人類健康和經(jīng)濟發(fā)展。世界衛(wèi)生組織調(diào)查顯示，近年來結(jié)核病在全球范圍內(nèi)發(fā)病率呈急劇上升趨勢，死亡率居傳染性疾病死亡率第二名，我國是結(jié)核病高負擔國家之一。全球有將近三分之一的人存在潛伏性結(jié)核感染(LTBI)，其中5–20％的人在兩到五年內(nèi)會發(fā)展成活動性結(jié)核。對潛伏性結(jié)核感染患者進行早期診斷和適當?shù)母深A，防止其發(fā)展成為活動性結(jié)核，是結(jié)核病防治的關(guān)鍵策略之一。目前對潛伏性結(jié)核病診斷主要基于IFN-γ的檢測。
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2、文建立了兩種IFN-γ定量檢測方法：以包被有IFN-γ捕獲抗體的磁性微球為固相載體，采用HRP催化TMB顯色為檢測體系，建立了穩(wěn)定的磁酶免雙抗體夾心法定量檢測IFN-γ的方法。該方法在0-1000 pg/mL濃度范圍內(nèi)檢測線性良好，標準曲線線性公式為y=0.001x+0.0686，相關(guān)系數(shù)為0.9996，最低檢出限可達23.2 pg/mL。磁酶免的檢測方法比傳統(tǒng)的ELISA方法操作簡單（只需要一步清洗），檢測時間更短（2 h），重現(xiàn)性很

3、好，并且有很大的快速、自動化、高通量、多指標檢測的應(yīng)用前景。另外，我們建立了AlphaLISA定量檢測IFN-γ方法，此方法在IFN-γ為0-8 IU/mL的濃度范圍內(nèi)線性非常好，擬合得到的線性方程為y=2199.8x+2073.8，標準曲線相關(guān)系數(shù) R2=0.9997，檢測低限為19.0 mIU/mL，方法的回收率為81.6%到102.1%，批間和批內(nèi)變異系數(shù)小于5%。并且，此方法的穩(wěn)定性良好，受基質(zhì)效應(yīng)影響小，反應(yīng)只需半小時。