紫錐菊多糖對(duì)大腸桿菌內(nèi)毒素的作用機(jī)理研究.pdf

1、紫錐菊屬(Echinacea Moenck)為多年生菊科草本野生花卉，雙子葉植物綱，具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗氧化、抗菌、抗病毒及抗癌等作用，為世界聞名的“免疫”草藥，該植物最早被北美印地安人用于各種感染、肺結(jié)核、昆蟲、蛇咬傷等?，F(xiàn)在被廣泛用于免疫調(diào)節(jié)劑和免疫促進(jìn)劑，內(nèi)毒素是大腸桿菌陰性菌細(xì)胞壁成分，也即脂多糖（lipopolysaccharide，LPS），它是細(xì)菌裂解死亡時(shí)釋放出來(lái)的，當(dāng)機(jī)體病灶內(nèi)大量細(xì)菌死亡時(shí)，釋放大量的內(nèi)毒素入血，從

2、而導(dǎo)致內(nèi)毒素血癥，誘導(dǎo)全身過(guò)度的炎癥反應(yīng)，造成機(jī)體細(xì)胞、組織器官損傷，甚至造成機(jī)體死亡。給人類造成危害。
　　本文實(shí)驗(yàn)中，體外先研究紫錐菊多糖對(duì)LPS損傷后小腸上皮細(xì)胞株IEC-6的影響，采用MTT方法檢測(cè)IEC-6細(xì)胞的細(xì)胞增殖率;RT-PCR方法檢測(cè)IEC-6細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-8mRNA表達(dá)水平;western blot方法檢測(cè)IEC-6細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子NF-κB p65、pIκBα蛋

3、白表達(dá)水平;從而明確紫錐菊多糖對(duì)LPS作用后IEC-6細(xì)胞的作用機(jī)制。體內(nèi)再以脂多糖LPS誘導(dǎo)小鼠內(nèi)毒素?fù)p傷炎癥模型，通過(guò)ELISA方法檢測(cè)血清TNF-α、IL-1β、IL-6細(xì)胞因子的表達(dá)水平，石蠟切片檢測(cè)肺組織及干濕重檢測(cè)肺水腫的嚴(yán)重程度;實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)肺組織中COX-2、iNOS、HO-1、NF-κB mRNA表達(dá)水平，從而在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型上研究紫錐菊多糖對(duì)內(nèi)毒素?fù)p傷的作用機(jī)制，進(jìn)而明確紫錐菊多糖是否能為內(nèi)毒素?fù)p傷小鼠提

4、供保護(hù)作用。
　　研究結(jié)果顯示紫錐菊多糖預(yù)處理能增強(qiáng)LPS損傷后IEC-6細(xì)胞的增殖活性，對(duì)LPS損傷后IEC-6細(xì)胞分泌的因子TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-8的抑制作用具有濃度及時(shí)間依賴性，且能抑制NF-κB p65、pIκBα蛋白表達(dá)水平，從麗降低了LPS對(duì)IEC-6細(xì)胞的損傷，對(duì)細(xì)胞具有保護(hù)作用。紫錐菊多糖組也有效抑制了內(nèi)毒素?fù)p傷小鼠血清中細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6表達(dá)水平，及肺組織中炎癥因子COX-