重組?？窠?jīng)毒素在大腸桿菌中的高表達(dá)、純化、活性、構(gòu)效關(guān)系及作用機(jī)理的研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文重組?？窠?jīng)毒素在大腸桿菌中的高表達(dá)、純化、活性、構(gòu)效關(guān)系及作用機(jī)理的研究姓名：王磊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：徐安龍20040422毒素增強(qiáng)心肌收縮的能力分別是西地蘭的638倍、24l倍、269倍和O95倍。重組?？窠?jīng)毒素rHk2a具有最強(qiáng)的強(qiáng)心活性，rHk7a具有最長(zhǎng)時(shí)間的強(qiáng)心活性；而rHk8a的毒性最強(qiáng)，在2X10—8mol／L濃度下，rflk8a增強(qiáng)心肌收縮的活性維持時(shí)間最短，正常

2、情況下僅維持10分鐘，低鈣情況下僅維持40分鐘心臟就停止跳動(dòng)，顯示出了較強(qiáng)的毒性。比較四種?？窠?jīng)毒素的序列和活性的差異，推測(cè)出?？窠?jīng)毒素的第14位氨基酸可能與毒素的作用時(shí)間有關(guān)，而不是與活性強(qiáng)弱有關(guān)，第37位氨基酸則影響了毒素的毒性。利用膜片鉗技術(shù)，研究了四種重組?？窠?jīng)毒素對(duì)SD乳鼠急性分離的神經(jīng)元鈉離子通道的作用。研究結(jié)果表明，四種?？窠?jīng)毒素均可延長(zhǎng)鈉離子通道的開(kāi)放時(shí)間，而且還可以增強(qiáng)鈉離子通道的開(kāi)放概率。其中rHkTa延長(zhǎng)鈉