基于腎上腺素能受體研究肝郁-心理應(yīng)激對(duì)人子宮肌瘤細(xì)胞增殖及ER、PR表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　本課題以國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（編號(hào)：81072838）為依托進(jìn)行設(shè)計(jì)。在中醫(yī)學(xué)“情志學(xué)說”理論基礎(chǔ)上，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)“心理應(yīng)激理論”，基于課題組前期應(yīng)用去甲腎上腺素（Norepinephrine，NE）、腎上腺素（Epinephrine，E）、異丙腎上腺素（Isoproterenol，ISO）作用于體外培養(yǎng)的人子宮肌瘤（Uterine leiomyomas，ULM）平滑肌細(xì)胞，證實(shí)神經(jīng)遞質(zhì)與ULM細(xì)胞增殖、雌激素受體

2、（Estrogen receptor，ER）和孕激素受體（Progesterone receptor，PR）表達(dá)有明顯相關(guān)性的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究NE及其拮抗劑酚妥拉明對(duì)ULM細(xì)胞體外生長(zhǎng)的影響。探討肝郁－心理應(yīng)激通過激活腎上腺素能受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響ULM細(xì)胞體外增殖及ER、PR蛋白表達(dá)的機(jī)制，揭示肝郁－心理應(yīng)激在子宮肌瘤發(fā)病中的作用，為臨床從肝郁－心理應(yīng)激角度防治ULM提供新的思路和方法，并為中醫(yī)學(xué)“情志學(xué)說”提供新的理論依據(jù)。

3、>　　方法：
　　以人子宮肌瘤組織（經(jīng)病理檢查證實(shí)）為材料，應(yīng)用膠原酶消化法，體外分離、培養(yǎng)獲得ULM細(xì)胞，經(jīng)HE及免疫細(xì)胞化學(xué)SABC法進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定。將培養(yǎng)的ULM細(xì)胞分為三組：Α.對(duì)照組；B. NE組；C. NE+酚妥拉明組。B組添加NE1μmol/L，C組預(yù)先加酚妥拉明1μmol/L培養(yǎng)1h后加NE1μmol/L，三組細(xì)胞培養(yǎng)12h后收集。應(yīng)用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況；采用競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）測(cè)定各組細(xì)胞E

4、R、PR蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1．成功培養(yǎng)了人ULM平滑肌細(xì)胞，并通過了HE染色及免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定。
　　2．NE及酚妥拉明對(duì)ULM細(xì)胞增殖的影響：
　　與對(duì)照組比較，NE組代表ULM細(xì)胞增殖情況的OD值明顯高于空白組，差異有顯著性(P<0.05)。NE+酚妥拉明組與 NE組比較，OD值低于NE組，差異無顯著性((P>0.05)。NE+酚妥拉明組與對(duì)照組比較，OD值高于對(duì)照組，差異有顯著性(P<0.05)

5、。
　　3．NE及酚妥拉明對(duì)ULM細(xì)胞ER表達(dá)的影響：
　　與對(duì)照組比較，NE組ULM細(xì)胞ER蛋白表達(dá)明顯高于對(duì)照組，差異有顯著性(P<0.05)。NE+酚妥拉明組與NE組比較，ULM細(xì)胞ER蛋白表達(dá)明顯低于NE組，差異有顯著性(P<0.05)。NE+酚妥拉明組與對(duì)照組比較,ER蛋白表達(dá)明顯低于對(duì)照組，差異有顯著性(P<0.05)。
　　4．NE及酚妥拉明對(duì)ULM細(xì)胞PR表達(dá)的影響：
　　與對(duì)照組比較，NE組UL

6、M細(xì)胞PR蛋白表達(dá)明顯高于對(duì)照組，差異有顯著性(P<0.05)。NE+酚妥拉明組與NE組比較，ULM細(xì)胞PR蛋白表達(dá)明顯低于NE組，差異有顯著性(P<0.05)。NE+酚妥拉明組與對(duì)照組比較，ULM細(xì)胞PR蛋白表達(dá)高于對(duì)照組，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.NE具有促進(jìn)ULM細(xì)胞增殖的作用。
　　2.NE具有促進(jìn)ULM細(xì)胞ER、PR蛋白表達(dá)的作用，而酚妥拉明抑制ULM細(xì)胞ER、PR蛋白的表達(dá)。<