I3C通過調(diào)控p53泛素化對喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:本研究就I3C對人喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡及其與 p53/MDM2的蛋白表達(dá)水平的變化之間的關(guān)系，闡明I3C對喉癌細(xì)胞的作用機(jī)制，為喉癌治療的藥物篩選提供理論依據(jù)。
　　方法:本文采用RPM1640培養(yǎng)基行喉癌Hep-2細(xì)胞的培養(yǎng)。運(yùn)用 MTT比色法，檢測了不同時(shí)間點(diǎn)(0、12h、24h、72h)不同濃度的I3C（0μM、75μM、150μM）對Hep-2細(xì)胞存活率的影響；運(yùn)用半定量RT-PCR法，檢測150μM的I3C對He

2、p-2處理72h后細(xì)胞內(nèi)p53、MDM2、BAX及Bcl-2 mRNA的表達(dá)情況；運(yùn)用Western Blotting法，檢測150μM的I3C對Hep-2處理72h后細(xì)胞內(nèi)p53、MDM2、BAX及Bcl-2蛋白的表達(dá)，探討其抑制Hep-2細(xì)胞增殖的具體作用機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　1．MTT結(jié)果顯示，與對照組(T0)相比,給藥組細(xì)胞的OD值隨藥物作用時(shí)間的延長而降低(P<0.05)；給藥后的同一時(shí)間點(diǎn)，高濃度組（150μM

3、）細(xì)胞的OD值均低于低濃度組（75μM），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)
　　2．PCR結(jié)果顯示，使用150μM的I3C作用于Hep-2細(xì)胞72h后，與對照組相比，細(xì)胞內(nèi)MDM2及Bcl-2 mRNA的表達(dá)降低（P<0.05），而p53及BAX mRNA的表達(dá)增高（P<0.05）。
　　3．Western Blotting結(jié)果顯示，使用150μM的I3C作用于Hep-2細(xì)胞72h后，與對照組相比，細(xì)胞內(nèi)MDM2及Bcl-2蛋