丁苯酞激活腦梗死大鼠下調(diào)腦區(qū)的DTI評(píng)估.pdf

1、背景和目的：
　　通過對(duì)大鼠MCAO模型缺血腦組織及下調(diào)腦區(qū)的DTI成像評(píng)價(jià)，探討其與RGMa蛋白表達(dá)的相關(guān)性，并進(jìn)一步探討丁苯酞下調(diào)缺血腦組織及下調(diào)腦區(qū)RGMa的表達(dá)，促進(jìn)軸突再生，從而改善大鼠的神經(jīng)功能恢復(fù)及其影像學(xué)表現(xiàn)。
　　材料與方法：
　　1、將140只健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分為以下四組：假手術(shù)組、MCAO模型組、生理鹽水組及丁苯酞組，每組35只。線栓法制作 MCAO模型。丁苯酞組，制作MCAO模型后腹腔注射

2、丁苯酞藥，給藥劑量按80m g/kg計(jì)算；生理鹽水組，給予相同體積的生理鹽水。
　　2、隨機(jī)取SD大鼠20只，假手術(shù)組、MCAO模型組、生理鹽水組和丁苯酞組每組5只，各組大鼠在造模成功后1h、3h、6h、12h、24h進(jìn)行磁共振檢查和神經(jīng)功能評(píng)分。磁共振掃描采用美國GE Discovery MR7503.0T超導(dǎo)高場磁共振掃描機(jī)，上海晨光大鼠專用線圈，動(dòng)物固定于仰臥位，頭先進(jìn)，以視交叉為掃描中心，行軸位常規(guī)T1WI、T2WI、DW

3、I、DTI等序列檢查。分別計(jì)算病灶側(cè)與小腦半球的ADC值、FA值。
　　3、取SD大鼠60只，假手術(shù)組、MCAO模型組、生理鹽水組和丁苯酞組每組15只，在大鼠MCAO模型后1h、3h、6h、12h、24h，Western blot法測定缺血腦組織、小腦半球的RGMa蛋白表達(dá)；另外60只（每組15只），取缺血腦組織及小腦半球行石蠟切片，進(jìn)行免疫組化染色，觀測RGMa蛋白和NF-200蛋白的表達(dá)。
　　4、所有的數(shù)據(jù)均使用SPS

4、S17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料采用x?s記錄。采用的檢驗(yàn)方法有t檢驗(yàn)，同一組不同時(shí)間點(diǎn)采用重復(fù)測量方差分析，不同組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SLD檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearmen相關(guān)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、MCAO模型組、生理鹽水組、丁苯酞組的改良的神經(jīng)功能評(píng)分（Modified Neurological Severity Score，

5、mNSS）均高于假手術(shù)組，且隨著時(shí)間的延長，mNSS評(píng)分越高；在缺血后3h、6h、12h、24h時(shí)，丁苯酞組的mNSS評(píng)分較 MCAO模型組降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　2、MCAO模型組、生理鹽水組大鼠缺血后1h，缺血區(qū)ADC值、FA值開始降低，12h降至最低后有所升高；在缺血后3h、6h、12h、24h時(shí)，丁苯酞組缺血區(qū)ADC值、FA值較MCAO模型組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MCAO模型組、生理鹽水組大鼠小腦

6、半球缺血后1h后，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)ADC值、FA值較假手術(shù)組降低，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；丁苯酞組大鼠小腦半球ADC值、FA值較MCAO模型組升高，在12h、24h兩組間的ADC值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在3h、6h、12h、24h時(shí)間點(diǎn)兩組間的FA值差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　3、MCAO模型組、生理鹽水組大鼠缺血后，不同時(shí)間點(diǎn)缺血區(qū)的RGMa蛋白陽性表達(dá)均有所增加，呈棕黃色染色。局灶性腦缺血后 RGMa蛋白表達(dá)逐漸

7、增多，在12h表達(dá)量最多；丁苯酞組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的RGMa蛋白的表達(dá)較MCAO模型組有所降低，在6h、12h、24h時(shí)間點(diǎn)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；小腦半球RGMa蛋白表達(dá)與腦缺血區(qū)變化類似，丁苯酞組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的RGMa的表達(dá)較MCAO模型組降低，1h、3h、6h、12h時(shí)間點(diǎn)的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）
　　4、MCAO模型組、生理鹽水組大鼠缺血后3h，缺血區(qū)及小腦半球的NF-200蛋白陽性表達(dá)降低，呈棕黃色染色。隨著時(shí)間延長

8、，NF-200表達(dá)逐漸減少；丁苯酞組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的NF-200表達(dá)較MCAO模型組有所增加，在6h、12h和24h時(shí)間點(diǎn)兩組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　5、各手術(shù)組大鼠的mNSS神經(jīng)功能評(píng)分與缺血性腦梗死核心區(qū)FA值呈負(fù)相關(guān)，與RGMa蛋白表達(dá)存在正相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1、腦梗死區(qū)腦組織RGMa表達(dá)上調(diào)參與大鼠腦功能神經(jīng)功能損傷的發(fā)生。
　　2、丁苯酞通過下調(diào)RGMa蛋白表達(dá)，促進(jìn)腦梗死下調(diào)腦區(qū)