PDSS2基因過(guò)表達(dá)影響結(jié)腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)的初步研究.pdf

1、目的：通過(guò)觀察PDSS2基因過(guò)表達(dá)對(duì)人結(jié)腸癌SW480、HCT116細(xì)胞的細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞遷移及侵襲能力等生物學(xué)行為的影響，為明確PDSS2與結(jié)腸癌的關(guān)系提供依據(jù)。
　　方法：
　　1、構(gòu)建PDSS2過(guò)表達(dá)質(zhì)粒（PC3.1-PDSS2）；
　　2、分別轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌SW480、HCT116細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)分為兩組：對(duì)照組（SW480組、HCT116組）轉(zhuǎn)染空白質(zhì)粒、實(shí)驗(yàn)組（PDSS2組）轉(zhuǎn)染PDSS2

2、過(guò)表達(dá)質(zhì)粒；
　　3、MTS檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖情況；
　　4、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡率；
　　5、Transwell法和劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力和細(xì)胞侵襲能力的變化。
　　結(jié)果：（1）MTS檢測(cè)細(xì)胞增殖：a、SW480實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞d1、d2、d3增殖率分別為117.54％、161.19%、316.79%，其對(duì)照組為127.24%、206.72%、425.00%，差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；PDSS

3、2過(guò)表達(dá)d1、d2、d3對(duì)SW4080細(xì)胞增殖的抑制率分別為7.62%、22.02%、25.46%，對(duì)照組為0.00%、0.00%、0.00%，差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。b、HCT116實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞d1、d2、d3增殖率分別為115.04%、150.81%、248.37%，其對(duì)照組為118.97%、164.43%、289.33%，差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；PDSS2過(guò)表達(dá)d1、d2、d3對(duì)HCT116細(xì)胞增殖的抑制率分

4、別為5.98%、10.82%、16.53%，對(duì)照組為0.00%、0.00%、0.00%，差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　?。?）流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期：a、SW480實(shí)驗(yàn)組G1期細(xì)胞占70.24%，其對(duì)照組59.54%；SW480實(shí)驗(yàn)組S期細(xì)胞25.00%、G2期4.77%，均低于其對(duì)照組的33.86%、6.60%；b、HCT116實(shí)驗(yàn)組G1期細(xì)胞占68.25%，其對(duì)照組57.10%；HCT116實(shí)驗(yàn)組S期細(xì)胞18.12%

5、、G2期13.63%，均低于其對(duì)照組的24.14%、18.76%。
　?。?）流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡：a、SW480實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞總凋亡率11.03%，其對(duì)照對(duì)照組為7.58%（P=0.012）。b、HCT116實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞總凋亡率為16.03%，其對(duì)照組為13.01%（P=0.015）。
　　（4）劃痕實(shí)驗(yàn)顯示培養(yǎng)48h后，a、SW480實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞間距離為|445.62±27.45|，其對(duì)照組為|335.03±31.69|；b、

6、HCT116實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞間距離為|259.34±13.2|，其對(duì)照組為|188.38±9.5|。
　?。?）Transwell法檢測(cè)：a、SW480實(shí)驗(yàn)組遷移細(xì)胞數(shù)為136.5±13.25，其對(duì)照組為350.50±30.17，差距均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；SW480實(shí)驗(yàn)組侵襲細(xì)胞數(shù)為59.17±9.85，其對(duì)照組為140.50±27.08，差距均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；b、HCT116實(shí)驗(yàn)組遷移細(xì)胞數(shù)為19.83±2

7、.32，其對(duì)照組為63.17±16.07，差距均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；SW480實(shí)驗(yàn)組侵襲細(xì)胞數(shù)為8.83±1.72，其對(duì)照組為37.33±4.27，差距均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　（1）PDSS2基因過(guò)表達(dá)可以抑制結(jié)腸癌細(xì)胞SW480、HCT116的增殖，阻止其從G1期向S期轉(zhuǎn)化；
　?。?）PDSS2基因過(guò)表達(dá)可以影響結(jié)腸癌細(xì)胞SW480、HCT116細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)。
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