真皮間充質干細胞在皮膚損傷修復過程中的作用.pdf

1、研究目的:
　　研究小鼠真皮間充質干細胞(dermis-derived mesenchymal stem cells,DMSCs)在皮膚創(chuàng)傷修復過程中的影響；探討表面標記物分別為DLK1+/Sca1-、DLK1-/Sca1+兩種DMSCs對創(chuàng)傷修復造成的影響之間的區(qū)別，為進一步揭示胚胎發(fā)育過程中真皮干細胞的功能以及探討傷口修復愈合過程中復雜的作用機制提供了新的研究方向以及實驗基礎。
　　研究方法:
　　利用膠原酶Ⅲ對小

2、鼠胚胎的皮膚組織進行消化，通過流式細胞儀對所得細胞表面標記物進行分析。使用免疫磁珠分選技術，分選出DLK1+/Sca1-以及DLK1-/Sca1+兩種類型真皮間充質干細胞，對其進行培養(yǎng)并收集上清；使用細胞免疫熒光技術，檢測DLK1+/Sca1-細胞的表面抗原，誘導DLK1+/Sca1-細胞進行成骨、成脂分化。利用紫外分光光譜儀繪制DMSCs上清的紫外吸收光譜。利用小鼠皮膚線性傷口模型以及環(huán)形切除模型觀察DMSCs上清的創(chuàng)傷修復作用。

3、r>　　實驗結果:
　　1.真皮來源的干細胞通過流式細胞儀檢測，陽性表達CD29，陰性表達CD34。
　　2.通過免疫磁珠分選技術分選出DLK1+/Sca1-以及DLK1-/Sca1+的兩種細胞后，在DLK1+/Sca1-細胞上用細胞免疫熒光技術，發(fā)現(xiàn)其陽性表達CD90，CD44。在促成骨、脂分化培養(yǎng)基的誘導下，DLK1+/Sca1-以及DLK1-/Sca1+這兩種均可以向成骨、脂方向分化。
　　3.真皮間充質干細胞上