脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合人工真皮（皮耐克）修復(fù)深度燒傷的研究.pdf

1、目的：
　　探討脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合人工真皮（皮耐克）對深度燒傷愈合的影響及機(jī)制的研究。
　　方法：
　　選用 SPF級綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因大鼠，取其腹股溝處脂肪墊，膠原酶消化法獲取脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞（Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells，ADSCs），流式分析細(xì)胞表面特異性標(biāo)志物，并誘導(dǎo)其向成脂細(xì)胞、成骨細(xì)胞等方向分化，觀察 ADSCs的多向分化能力。將制備成功的大鼠（成年雌性實(shí)驗(yàn)

2、級 SD大鼠）深度燒傷模型為兩組：A組：人工真皮（皮耐克）+ADSCs組；B組：人工真皮（皮耐克）+生理鹽水組。術(shù)后每天觀察創(chuàng)面有無感染、異常分泌物等情況，并每周記錄創(chuàng)面最大直徑以評估創(chuàng)面愈合情況。術(shù)后3周取創(chuàng)面皮膚組織進(jìn)行冰凍切片，評估 ADSCs參與創(chuàng)面愈合情況，HE切片觀察創(chuàng)面皮膚組織中肉芽組織增生和上皮化過程。
　　結(jié)果：
　　1.實(shí)現(xiàn)了大鼠 ADSCs的成功分離、培養(yǎng)、純化及鑒定，3代-10代內(nèi)基本按對數(shù)生長，形態(tài)

3、均一，具備典型的間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征。流式檢測結(jié)果顯示 ADSCs高表達(dá)間充質(zhì)標(biāo)記物 CD29、CD90、CD105；低表達(dá)造血系細(xì)胞表面標(biāo)記物 CD34及血管內(nèi)皮性抗原 CD45。
　　2.皮膚深度燒傷模型顯示：與對照組相比，在1周、2周和3周的時(shí)間里ADSCs-皮耐克復(fù)合真皮治療組（A組）創(chuàng)面最大直徑明顯小于對照組（B組）創(chuàng)面，并且在實(shí)驗(yàn)組，創(chuàng)面愈合后的皮膚附屬結(jié)構(gòu)恢復(fù)情況好于對照組創(chuàng)面。HE染色顯示，A組、B組均與正常皮

4、膚結(jié)構(gòu)形態(tài)相似，但 A組形態(tài)更為接近正常皮膚結(jié)構(gòu)。熒光顯微鏡下，移植了 ADSCs的A組創(chuàng)面組織可見位于散落點(diǎn)狀熒光。
　　結(jié)論：
　　1.人工真皮（皮耐克）具有很好的吸附性、親和性和保濕性，且生物來源廣泛、價(jià)格低廉、安全無毒，是一種極佳的可應(yīng)用于創(chuàng)面修復(fù)的生物工程材料。2. ADSCs免疫原性低，移植于大鼠深度燒傷創(chuàng)面后一定時(shí)期內(nèi)仍可在組織內(nèi)存活而不被排斥，保證了移植后持續(xù)發(fā)揮作用。同時(shí)，人工真皮（皮耐克）可在創(chuàng)面上形成一