TRPM2外顯子單核苷酸多態(tài)性rs1556314與膿毒癥的相關(guān)性研究.pdf

1、膿毒癥是宿主對感染反應(yīng)失控導(dǎo)致危及生命的器官功能障礙，常并發(fā)于嚴重創(chuàng)傷、嚴重燒傷以及外科大手術(shù)后的患者，也是導(dǎo)致這些危重病患者死亡的重要原因之一。研究顯示全球每年新增膿毒癥病人近2000萬例，雖然，隨著早期廣譜抗生素的應(yīng)用、容量治療和器官功能保護等集束化治療策略的完善和改進，膿毒癥病人的救治成功率取得了明顯的改善，但是，其病死率仍高達25％。同時，研究顯示，2011年膿毒癥病人醫(yī)療費用占全美住院費用的5.2％（高達200億美元），醫(yī)療費

2、用高，醫(yī)療資源耗費巨大，已對人類健康構(gòu)成巨大威脅。
　　膿毒癥是環(huán)境因素和遺傳因素等相互作用的一種多因素復(fù)雜性疾病，膿毒癥的發(fā)生發(fā)展與病原體的種類強度以及宿主的基因易感性、免疫狀態(tài)以及基礎(chǔ)共患疾病相關(guān)。研究結(jié)果顯示不同地區(qū)、不同種族的膿毒癥的發(fā)生發(fā)展結(jié)局存在個體差異。遺傳變異特別是基因單核苷酸多態(tài)性參與了膿毒癥的病理生理過程，與機體對膿毒癥的易感性以及預(yù)后密切相關(guān)，因此，探尋膿毒癥的易感和預(yù)后基因以及其多態(tài)性位點將有利于為膿毒癥預(yù)

3、警和防治提供理論指導(dǎo)。
　　膿毒癥發(fā)病機制復(fù)雜，病原微生物入侵后，機體免疫細胞通過膜表面表達的多種受體介導(dǎo)免疫炎癥反應(yīng)參與膿毒癥的發(fā)生和發(fā)展。瞬時受體電位通道M2(Transient Receptor Potential Melastatin2，TRPM2)是一種可滲透非選擇性的鈣離子通道受體。研究表明TRPM2大量表達在單核巨噬細胞，并且在機體炎癥發(fā)應(yīng)和免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用。研究已證實TRPM2可以通過調(diào)節(jié)巨噬細胞的活化、

4、吞噬和炎癥反應(yīng)等功能，從而參與膿毒癥發(fā)生發(fā)展。
　　研究發(fā)現(xiàn)TRPM2第11個外顯子的突變位點rs1556314(Asp543 Glu)是目前發(fā)現(xiàn)的位于TRPM2基因外顯子區(qū)域的有較高最小等位基因頻率的遺傳變異，刪除TRPM2第11號外顯子的一部分序列（包含rs1556314位點）能降低TRPM2對ADP核糖體、H2O2等激活因子的反應(yīng)，導(dǎo)致細胞內(nèi)Ca2+平衡失調(diào)以及氧化應(yīng)激反應(yīng)失調(diào)，在單核巨噬細胞免疫功能調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。并且

5、，研究顯示rs1556314的堿基改變與雙向情感障礙和抑郁躁狂癥明顯相關(guān)。但是，TRPM2基因的遺傳變異（TRPM2 SNP rs1556314）是否參與膿毒癥的發(fā)生和發(fā)展尚不清楚。
　　目的:
　　探討瞬時受體電位通道M2（transient receptor potential melastatin2，TRPM2）外顯子單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP) rs15563

6、14與膿毒癥易感性與預(yù)后的相關(guān)性。
　　方法:
　　本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準，并獲得患者知情同意。共納入浙江大學(xué)附屬第一醫(yī)院ICU確診為膿毒癥的患者119例。排除懷孕以及年齡小于18歲的患者。按照住院28天轉(zhuǎn)歸的不同又將其分為存活者組（57例）和死亡者組（62例）。對照組為112例外科大手術(shù)后未發(fā)生膿毒癥的患者。以2％乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)抗凝管抽取受試者外周靜脈血5 ml，采用QIAamp DNA Blood Mi

7、ni Kit（Qiagen公司）嚴格按照說明書提取樣本基因組DNA。采用Taqman探針實時PCR方法檢測基因型，并用直接測序法再次驗證。實驗數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析，計量資料用均數(shù)±標準差（Mean±SD）表示，計數(shù)資料用百分比表示，對兩組基因型和等位基因頻率組間差異比較采用x2檢驗，P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)果:
　　膿毒癥患者與對照組患者在性別、年齡等方面均無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。膿毒癥患者與對照組