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1、目的:1 人血小板因子4(hPF4)原核高效表達(dá)克隆的構(gòu)建;2 重組hPF4的表達(dá)及分離、純化工藝研究;3 重組hPF4的特性研究.結(jié)論:該研究運(yùn)用PCR定點(diǎn)突變技術(shù),完全去除了hPF4 cDNA基因3’端UTR AT富含區(qū);改用大腸桿菌強(qiáng)串聯(lián)終止密碼子TAATAA,成功構(gòu)建高效表達(dá)克隆PBV220-rhPF4.我們構(gòu)建的rhPF4原核高效表達(dá)系統(tǒng)經(jīng)SDS-PAGE及凝膠密度掃描分析結(jié)果表明,rhPF4表達(dá)量占菌體總蛋白量的25-30﹪
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