氧濃度的變化對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞粘附能力的影響.pdf

1、背景：間充質(zhì)干細(xì)胞是具有多向分化潛能的非造血干細(xì)胞，已廣泛應(yīng)用于干細(xì)胞移植、組織工程和器官移植免疫治療等方面，特別是成為構(gòu)建組織工程血管中重要的種子細(xì)胞，但其具體機(jī)制不完全清楚。
　　目的：探討在氧濃度改變對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞粘附能力的影響。
　　方法：采用SD大鼠20只，年齡6-8周、雌雄不限、體重100g-120g，獲取其股骨和脛骨骨髓細(xì)胞懸液，貼壁法分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。流式細(xì)胞鑒定實(shí)驗(yàn)細(xì)胞CD54、CD29、CD9

2、0、CD45表達(dá)，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分別在分為低氧組(1％O2)和常氧組(20％O2)培養(yǎng)0-7天。根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)和沖涮時(shí)氧濃度，細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)分組為20％O2培養(yǎng)20％O2粘附?jīng)_涮組(A組)、1％O2培養(yǎng)1％O2粘附?jīng)_涮組(B組)、20％O2培養(yǎng)1％O2粘附?jīng)_涮組(C組)和1％O2培養(yǎng)20％O2粘附?jīng)_涮組(D組)，比較不同氧濃度變化條件下細(xì)胞殘留率。研究不同氧濃度變化對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá)HIF-1a，Integrin betal，VCAM1和

3、ICAM1的影響，實(shí)驗(yàn)分為4組：1組：恒定20％ O2培養(yǎng)；2組：恒定1％ O2培養(yǎng)；3組：20％O2培養(yǎng)后于1％O2繼續(xù)培養(yǎng)2h；4組：1％O2培養(yǎng)后20％O2繼續(xù)培養(yǎng)2h。
　　結(jié)果：流式細(xì)胞檢測(cè)99％以上實(shí)驗(yàn)細(xì)胞表達(dá)CD54+、CD29+、CD90+，1％實(shí)驗(yàn)細(xì)胞表達(dá)CD45+，證實(shí)細(xì)胞為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在1％O2環(huán)境下(A組和B組)粘附能力增強(qiáng)，在20％O2環(huán)境下(C組和B組)粘附能力減弱(P<0.05)