低氧誘導因子1α介導大鼠心肌缺血后適應的保護作用.pdf

1、目的:建立大鼠在體的心肌缺血后適應的模型，應用建立的模型通過測定多個指標，研究缺血后適應對心肌的保護作用，探討低氧誘導因子1a(HIF-1a)在心肌缺血后適應中心肌保護的作用及機制。
　　方法:健康的SD成年大鼠40只(SPF級，由遼寧長生生物技術有限公司提供)，體重（314±4.8）g，雌雄不限。40只大鼠隨機分為4組，每組10只。A組為對照組，只在冠狀動脈前降支穿線，不結扎;B組為缺血再灌注組，阻斷冠狀動脈前降支45分鐘，后再

2、灌注3小時;C組為缺血后適應組，阻斷冠狀動脈前降支45分鐘，后在再灌注瞬間實施再灌注10秒-缺血10秒，共3個循環(huán)的干預，隨后再灌注3小時。D組缺血后適應+HIF-1a抑制劑組，阻斷冠狀動脈前降支45分鐘后，腹腔注射低氧誘導因子1a抑制劑(AG490)3ug/g，后給予與C組相同的后適應操作。大鼠成功氣管插管后，在右側股靜脈留置靜脈通路并作肝素化處理。在結扎冠脈前降支前，缺血45分鐘后，再灌注3小時后三個時間點在股靜脈處采血0.5毫升，

3、分別測定血清中的肌酸激酶、肌鈣蛋白含量;再灌注3小時后取大鼠心臟用TTC染色法測定梗死心肌的面積;用Western Blot方法測定組織中低氧誘導因子1a(H1F-1a)在各組中的表達情況。
　　結果:1、心電圖的變化A組SD大鼠在正常開胸狀態(tài)下，僅偶爾出現(xiàn)室性早搏，B、C、D組結扎后及再灌注時均出現(xiàn)以下心電圖表現(xiàn):結扎冠狀動脈后，R波增高、變寬，伴ST段抬高，伴有心律失常（包括室性早搏及短陣室性心動過速），再灌注后表現(xiàn)為增高的R

4、波振幅回落，抬高的ST段下降，并伴有室早等心律失常，隨再灌注時間延長，心律失常逐漸消失。
　　2、血清肌酸激酶的含量測定結扎前四組間提示無統(tǒng)計學差異。缺血45分鐘后，A組以外的三組肌酸激酶(CK)均較前升高，表現(xiàn)為B、C、D組含量都顯著高于A組(P＜0.01)，而B、C、D組間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05);再灌注3小時后，B、C、D組肌酸激酶(CK)較缺血后升高，其中B組含量高于A組(P＜0.01)，B組含量高于C組(P＜0.05

5、)，D組含量高于C組(P＜0.05)，B組與D組之間比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　3、血清肌鈣蛋白含量的測定結扎前四組間提示無統(tǒng)計學差異。缺血45分鐘后，A組以外的三組肌鈣蛋白均較前升高，表現(xiàn)為B、C、D組含量都顯著高于A組(P＜0.01)，而B、C、D組間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05);再灌注3小時后，B、C、D組肌鈣蛋白較缺血后升高，其中B組、D組含量均高于C組(P＜0.05)，而B組與D組之間比較無統(tǒng)計學差異(P＞0

6、.05)。
　　4、心肌梗死面積測定B、C、D組心肌梗死面積均顯著大于A組(P＜0.01);B、D組顯著大于C組(P＜0.05);B組與D組比較梗死面積無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　5、心肌組織中缺氧誘導因子1a的表達A組的HIF-1a蛋白微量表達;B組HIF-1a蛋白表達高于A組(P＜0.05);C組HIF-1a蛋白顯著高于B組(P＜0.05);D組HIF-1a蛋白幾乎不表達;
　　結論：缺血后適應增加HIF-