2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究FICD單藥以及與Sorafenib聯(lián)合用藥對體外培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞HepG2和小鼠荷H22肝癌實(shí)體瘤生長的抑制作用,并探索其分子機(jī)制。
  方法:采用四氮唑鹽(3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliu mromide, MTT)還原法測定FICD單藥及與 Sorafenib聯(lián)合用藥對體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞生長的抑制作用。采用荷H22小鼠肝癌實(shí)體瘤模型,以腫

2、瘤的重量、抑瘤率為指標(biāo),研究FICD單藥及與Sorafenib聯(lián)合對體內(nèi)腫瘤生長的抑制作用。采用流式細(xì)胞儀檢測FICD單藥及與Sorafenib聯(lián)合對HepG2細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的影響。采用激光共聚焦顯微鏡法觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)。Western blotting檢測FICD單藥及與Sorafenib聯(lián)合用藥對人肝癌HepG2細(xì)胞中β-Catenin、C-Myc、Vimentin、CyclinD1和Ki-67蛋白表達(dá)的影響。
  結(jié)果:

3、 MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:FICD濃度依賴性地抑制人肝癌HepG2和SMMC-7721、膠質(zhì)瘤U251、宮頸癌HeLa、胃癌MGC-231、乳腺癌MAD-MB-231細(xì)胞生長,作用48 h IC50分別為10.1μg/mL、14.2μg/mL、16.8μg/mL、17.3μg/mL、18.6μg/mL和15.6μg/mL。根據(jù) IC50可知FICD對肝癌HepG2和SMMC-7721細(xì)胞作用最強(qiáng)。進(jìn)一步研究證實(shí)FICD能時(shí)間、濃度依賴性地抑

4、制人肝癌HepG2細(xì)胞生長,作用24 h、48 h和72 h的IC50分別為16.8μg/mL、9.8μg/mL和6.7μg/mL。流式細(xì)胞儀和激光共聚焦顯微鏡法表明FICD能明顯誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡,并阻止細(xì)胞周期于G2/M。Western Blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明FICD使β-Catenin, C-Myc,CyclinD1和Ki-67蛋白下調(diào),而使Vimentin蛋白表達(dá)增加。進(jìn)一步體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)FICD灌胃和腹腔注射給藥對H2

5、2肝癌細(xì)胞生長有相同的抑制作用,50、100、150 mg/kg腹腔注射抑制率分別為40.3%、46.3%和53.0%,灌胃給藥的抑制率分別為40.1%、48.2%和53.4%。FICD與Sorafenib聯(lián)合用藥體外對HepG2細(xì)胞生長有明顯的協(xié)同抑制作用,體內(nèi)對H22肝癌細(xì)胞生長也有明顯的協(xié)同抑制作用。FICD與Sorafenib聯(lián)合用藥還能促進(jìn)HepG2細(xì)胞凋亡。FICD10μg/mL使HepG2細(xì)胞G0/G1期和S期細(xì)胞減少,增

6、加G2/M期細(xì)胞;Sorafenib4μg/mL增加G0/G1期細(xì)胞而減少S期和G2/M期細(xì)胞;兩者合用后和Sorafenib4μg/mL比,G0/G1期細(xì)胞減少而S期和G2/M期細(xì)胞增加。FICD10μg/mL和Sorafenib4μg/mL單用或合用均明顯降低β-Catenin,C-Myc,CyclinD1和Ki-67蛋白表達(dá)水平;兩藥單用時(shí)均明顯增加Vimentin蛋白表達(dá)量,而聯(lián)合用藥時(shí)Vimentin蛋白表達(dá)明顯減少。

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