茶堿、咖啡因、可可堿對(duì)胰α-淀粉酶部分理化性質(zhì)的影響.pdf

1、胰α-淀粉酶（Pancreatic Amylase,P-AMY）是一類α-淀粉酶（Amylase,AMY）同工酶，催化α-1，4-葡萄糖多聚體的水解，并對(duì)高等動(dòng)植物以及微小生物有機(jī)體中淀粉和肝糖的降解起重要作用。是消化動(dòng)物體攝入的糖類物質(zhì)的最重要的一種消化酶。 生物堿是一類含氮雜環(huán)的堿性天然有機(jī)物，廣泛存在于植物體內(nèi)，大多數(shù)具有重要的醫(yī)療價(jià)值。本文基于生物堿的廣泛應(yīng)用于食物和藥品，借助近年來發(fā)展迅速的光譜分析的辦法探討了三種生

2、物堿小分子與胰α-淀粉酶的相互作用。可可堿（Theobromine）、咖啡因（Caffeine）、茶堿（Theophylline）是黃嘌呤甲基衍生物，它們的母體結(jié)構(gòu)相同，只是甲基取代基的數(shù)目和位置不同。這三種物質(zhì)具有興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心臟和骨骼肌，舒張血管、松弛平滑肌和利尿等生理作用。茶堿、咖啡因和可可堿作為一類具有顯著生理作用的生物堿，普遍存在于茶葉、咖啡、可可、糖果等各種食品當(dāng)中。 本文首先定性考察了三種生物堿對(duì)胰α-淀粉

3、酶酶學(xué)性質(zhì)的影響。結(jié)果都表現(xiàn)為非競爭性抑制作用，抑制作用從強(qiáng)到弱的排序?yàn)椋嚎煽蓧A＞茶堿＞咖啡因。三種黃嘌呤甲基衍生物與胰α-淀粉酶相互作用后的紫外差譜顯示三種小分子都導(dǎo)致了胰α-淀粉酶紫外吸收的增強(qiáng)和峰的紅移。作用的時(shí)間并未對(duì)紫外光譜造成差異，這就提示我們生物堿小分子與胰a-淀粉酶的相互作用可能是瞬間完成的。從三種生物堿與胰a-淀粉酶相互作用后的熒光光譜變化，結(jié)果顯示三種生物堿都導(dǎo)致了胰a-淀粉酶熒光強(qiáng)度的淬滅和峰的紅移。根據(jù)Stern

4、-Volmer方程，計(jì)算了三種生物堿對(duì)胰a-淀粉酶的表觀淬滅常數(shù)，推測三種生物堿對(duì)胰a-淀粉酶的熒光影響可能屬于靜態(tài)淬滅機(jī)制。三種生物堿對(duì)胰a-淀粉酶的抑制動(dòng)力學(xué)研究與熒光淬滅和紫外增強(qiáng)的強(qiáng)弱排序一致。這一結(jié)果提示三種生物堿結(jié)合的部位并非酶的活性中心，且該部位可能具有芳香族氨基酸，并且可能是生物堿與胰a-淀粉酶通過次級(jí)鍵形成超分子復(fù)合物，引起胰a-淀粉酶的色氨酸殘基所在區(qū)域從分子表面進(jìn)入分子內(nèi)部，形成位阻，才產(chǎn)生了熒光淬滅、酶活抑制、紫