大鼠KCTD10基因的克隆及功能研究.pdf

1、　　腫瘤壞死因子α(TNF-α)是一個多功能的細(xì)胞因子，在許多細(xì)胞生理過程中起重要作用，比如細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖、B細(xì)胞激活、肝細(xì)胞的再生以及一些急性的細(xì)胞炎癥反應(yīng)等。人類的PDIP1(polymerasedelta-interactingprotein1)是一種受TNF-α和白介素6(IL-6)誘導(dǎo)的蛋白，并且能與增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和DNA聚合酶δ的小亞基有相互作用。PDIP1家族的另一個成員TNFAIP1蛋白(又稱為B12基因

2、)，能夠受TNF-α誘導(dǎo)，并且能與PCNA、P50相互作用。在大鼠中，也證實了PDIP1和TNFAIP1基因的存在并且已被克隆。本文用大鼠的PDIP1基因在GeneBank中搜尋到了一組與PDIP1有較大的序列相似性的EST，并且通過RACE擴增出了其cDNA全長，命名為KCTD10(PotassiumChannelTetramerisationDomain-containing10)。大鼠KCTD10與PDIP1及TNFAIP1在氨基

3、酸序列上高度保守，在N端區(qū)域，都有一個BTB/POZ的結(jié)構(gòu)域；而在C端區(qū)域，則是PCNA的結(jié)合基序(QTKV-EFP)。根據(jù)PDIP1和TNFAIP1能夠與PCNA和P50相互作用，本文用免疫共沉淀等方法確定了大鼠KCTD10與PCNA以及P50之間也有相互作用。同樣，因為TNF-α能夠誘導(dǎo)PDIP1和TNFAIP1基因的表達(dá)，本文通過TNF-α誘導(dǎo)NIH3T3細(xì)胞從而使KCTD10基因的表達(dá)水平升高，從而得出KCTD10同樣能夠被TN