犬用復(fù)方恩諾沙星納米乳的制備及藥效研究.pdf

1、目的：制備復(fù)方恩諾沙星納米乳，并對(duì)其質(zhì)量、安全性、透皮性能以及初步臨床療效進(jìn)行評(píng)價(jià)，為臨床治療犬膿皮病病提供一種藥物新劑型。
　　方法：（1）復(fù)方恩諾沙星納米乳的制備：根據(jù)恩諾沙星在不同油相中的溶解度篩選合適的油相，結(jié)合偽三元相圖篩選出最佳配方，以加水滴定法制備復(fù)方恩諾沙星納米乳。（2）復(fù)方恩諾沙星納米乳的質(zhì)量評(píng)價(jià)：用染色法鑒定其結(jié)構(gòu)類型，通過激光粒度分析儀測(cè)定其粒徑大小、粒度分布、多分散系數(shù)，用透射電子顯微鏡觀察其形態(tài)，用高效液

2、相色譜法測(cè)定藥物含量，經(jīng)高速離心試驗(yàn)、光照試驗(yàn)、長(zhǎng)期試驗(yàn)判斷其穩(wěn)定性。（3）復(fù)方恩諾沙星納米乳的安全性評(píng)價(jià)：通過單次、多次給藥皮膚刺激試驗(yàn)，皮膚過敏試驗(yàn)和皮膚急性毒性試驗(yàn)來考察其安全性。（4）復(fù)方恩諾沙星納米乳的透皮試驗(yàn)：利用改良的Franz擴(kuò)散裝置比較復(fù)方恩諾沙星納米乳、原藥混合液的透皮性能。（5）復(fù)方恩諾沙星納米乳的體外抑菌性能：用微量稀釋法測(cè)定復(fù)方恩諾沙星納米乳對(duì)病原菌的最小抑菌濃度，并與原藥混合液進(jìn)行對(duì)比。（6）復(fù)方恩諾沙星納米

3、乳的臨床藥效試驗(yàn)：以西北農(nóng)林科技大學(xué)寵物醫(yī)院膿皮病犬為研究對(duì)象，觀察復(fù)方恩諾沙星納米乳的臨床藥效。
　　結(jié)果：（1）復(fù)方恩諾沙星納米乳的配方：ENR0.94 wt％，CL0.40 wt%，油酸4.27 wt%，混合表面活性劑TWEEN-20/2-苯乙醇(Km=3∶1)31.25 wt%，蒸餾水63.54 wt%；（2）所制備的納米乳呈淡黃色，澄清透明，為水包油型結(jié)構(gòu)，乳滴呈均勻的圓球形，大小均一，無黏連，平均粒徑為14.50nm，

4、多分散系數(shù)0.06，Zeta電位為-15.30mV；離心、光照、長(zhǎng)期試驗(yàn)均無分層、絮凝、析出等現(xiàn)象。復(fù)方恩諾沙星納米乳中恩諾沙星最佳檢測(cè)波長(zhǎng)為271nm，在6μg/ml～100μg/ml的濃度范圍內(nèi)與對(duì)應(yīng)峰面積的線性關(guān)系良好，頭孢氨芐最佳檢測(cè)波長(zhǎng)為262nm，在6μg/ml～100μg/ml的濃度范圍內(nèi)與對(duì)應(yīng)峰面積的線性關(guān)系良好。（3）復(fù)方恩諾沙星納米乳無皮膚刺激性、無急性毒性、無致敏性，為安全性較高的皮膚用藥。（4）復(fù)方恩諾沙星納米乳

5、的透皮性能結(jié)果：復(fù)方恩諾沙星納米乳、原藥混合液中恩諾沙星的經(jīng)皮滲透速率分別為156.75±0.30665μg/cm2.h、107.58±0.90362μg/cm2.h，頭孢氨芐的經(jīng)皮滲透速率分別為19.61±0.04834μg/cm2.h,13.574±0.07263μg/cm2.h，表明復(fù)方恩諾沙星納米乳的透皮性能顯著優(yōu)于原藥混合液組（P<0.01）;皮膚切片展示復(fù)方恩諾沙星納米乳對(duì)角質(zhì)層的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生了改變，對(duì)膠原纖維原有的排列造成影響

6、，從而提高藥物在皮膚的滲透吸收。（5）復(fù)方恩諾沙星納米乳的體外抑菌性能結(jié)果：復(fù)方恩諾沙星納米乳對(duì)金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化膿棒狀桿菌和無乳鏈球菌的MIC分別是0.125、0.125、0.5、0.125μg/ml，MBC分別是2、2、4、1μg/ml，優(yōu)于恩諾沙星和頭孢氨芐原料藥液，說明以恩諾沙星、頭孢氨芐聯(lián)合用藥，提高了抑菌活性。（6）臨床藥效結(jié)果顯示，復(fù)方恩諾沙星納米乳對(duì)膿皮病犬兩周治愈率高于其他兩種市售外用制劑。
　　結(jié)