乳酸恩諾沙星可溶性粉在雞的藥動(dòng)學(xué)及不同恩諾沙星鹽制劑在雞的殘留消除規(guī)律研究.pdf

1、恩諾沙星(enrofloxacin)為動(dòng)物專用的第三代氟喹諾酮類抗菌藥。具有抗菌譜廣,殺菌活性強(qiáng),且與其他抗菌藥物無(wú)交叉耐藥性以及生物利用度高,體內(nèi)分布廣泛等良好的藥動(dòng)學(xué)特征,己廣泛用于國(guó)內(nèi)外獸醫(yī)臨床。由于恩諾沙星在水中極微溶解,因此人們?cè)噲D將恩諾沙星制成各種鹽以改變其溶解性能,進(jìn)而制成可溶性粉劑以方便臨床用藥。乳酸恩諾沙星、恩諾沙星鈉和鹽酸恩諾沙星正是這一努力的結(jié)果。本研究通過(guò)對(duì)乳酸恩諾沙星可溶性粉藥動(dòng)學(xué)的研究,了解乳酸恩諾沙星在雞體

2、內(nèi)的過(guò)程和生物利用度,為制定臨床合理給藥方案提供依據(jù);通過(guò)對(duì)恩諾沙星的不同鹽制劑在雞體內(nèi)的殘留消除規(guī)律研究,為制定其休藥期提供依據(jù),這對(duì)確保動(dòng)物性食品安全和消費(fèi)者的健康具有重要意義。
　　 1乳酸恩諾沙星可溶性粉在雞體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究
　　 對(duì)24只蘇禽黃羽肉雞分別靜注和內(nèi)服乳酸恩諾沙星10 mg/kg b.w.后進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)和生物利用度研究。血漿藥物濃度采用高效液相色譜法測(cè)定(HPLC),所得恩諾沙星血藥濃度數(shù)據(jù)用3p87

3、計(jì)算機(jī)軟件處理。靜注乳酸恩諾沙星后的血藥濃度—時(shí)間數(shù)據(jù)符合二室開放模型,主要?jiǎng)恿W(xué)參數(shù):t1/2α(0.45±0.16)h,t1/2β(7.02±1.42)h,CL(s)(0.38±0.10)L/kg/h,AUC(23.69±5.56)(mg/L)×h。內(nèi)服乳酸恩諾沙星的血藥濃度時(shí)間數(shù)據(jù),符合有吸收因素二室模型,主要?jiǎng)恿W(xué)參數(shù):t1/2ka(0.60±0.01)h,t1/2ke(8.25±1.73)h,tpeak(2.44±0.17)h

4、,Cmax(1.44±0.30)mg/L,AUC(20.74±3.80)(mg/L)×h,F87.54％。結(jié)果表明,乳酸恩諾沙星可溶性粉在雞體內(nèi)具有吸收快、分布廣、消除較慢以及內(nèi)服生物利用度高的藥動(dòng)學(xué)特征。
　　 2雞組織中恩諾沙星殘留的HPLC檢測(cè)方法的建立
　　 取肌肉、肝臟和腎臟等樣品絞碎后加入適量磷酸鹽緩沖液勻漿,加入定量的標(biāo)準(zhǔn)工作液,混勻,離心,取上清液,C18固相萃取柱凈化。收集的洗脫液經(jīng)濾膜過(guò)濾后供高效液相

5、色譜分析。色譜條件:色譜柱為Thermo ODS-2HYPERSIL C18(5.0μm,250×4.6mm),流動(dòng)相為0.05mol/L磷酸溶液/三乙胺和乙腈,流速:1 mL/min。高效液相色譜熒光檢測(cè)器檢測(cè),發(fā)射波長(zhǎng)和激發(fā)波長(zhǎng)分別為450nm和280nm。結(jié)果顯示,在本實(shí)驗(yàn)室條件下,恩諾沙星和環(huán)丙沙星在0.01～1.0μg/mL,呈線性相關(guān),相關(guān)系數(shù)大于0.999。檢測(cè)限為0.01 mg/kg。對(duì)空白試樣進(jìn)行3個(gè)水平(0.05、0

6、.1、1 mg/kg)加標(biāo)回收率測(cè)定,回收率為74.1％～86.8％,批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別小于10％和7.5％。上述方法符合中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公布的《動(dòng)物性食品中氟喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)——高效液相色譜法》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),獲得的技術(shù)參數(shù)能滿足本次雞組織中恩諾沙星殘留試驗(yàn)的檢測(cè)要求。
　　 3三種恩諾沙星可溶性粉在雞的殘留消除規(guī)律研究
　　 將乳酸恩諾沙星、恩諾沙星鈉和鹽酸恩諾沙星三種可溶性粉劑分別以臨床推薦劑量,即100 m

7、g/L(以恩諾沙星計(jì))給35只40日齡健康蘇禽黃羽肉雞混飲,連續(xù)給藥7 d。然后分別于停藥后4 h(即0休藥期)、1 d、3 d、5 d、7 d、9d、11d共7個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行采樣,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)宰殺5只雞,及時(shí)取肌肉、肝臟和腎臟等組織樣品。樣品經(jīng)絞碎后加入適量磷酸鹽緩沖液勻漿,離心,取上清液,C18固相萃取柱凈化。收集的洗脫液經(jīng)濾膜過(guò)濾后供高效液相色譜分析。結(jié)果如下:
　　 3.1乳酸恩諾沙星可溶性粉在雞的殘留消除規(guī)律:在0休藥期時(shí)

8、,測(cè)得的肌肉、肝臟和腎臟中的恩諾沙星標(biāo)志殘留物的殘留量分別為(1.899±0.922)mg/kg、(2.574±1.171)mg/kg和(0.967±0.624)mg/kg;肌肉、肝臟、腎臟組織中的恩諾沙星標(biāo)志殘留物的殘留量分別在停藥5 d、7d和3 d時(shí)降至相應(yīng)的最高殘留限量(MRL)以下。恩諾沙星標(biāo)志殘留物平均殘留量以實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)用WT1.4計(jì)算軟件擬合,肌肉、肝臟和腎臟的休藥期結(jié)果分別為7.689d、7.339d和4.529d。雞按推

9、薦劑量飲水給藥,建議休藥期至少為8d。
　　 3.2恩諾沙星鈉可溶性粉在雞的殘留消除規(guī)律:在0休藥期時(shí),測(cè)得的肌肉、肝臟和腎臟中的恩諾沙星標(biāo)志殘留物的殘留量分別為(1.253±0.319)mg/kg、(2.024±0.902)mg/kg和(0.576±0.099)mg/kg;肌肉、肝臟、腎臟組織中的恩諾沙星標(biāo)志殘留物的殘留量分別在停藥3 d、5 d和1d時(shí)降至相應(yīng)的MRL以下。實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)用WT1.4計(jì)算軟件擬合,肌肉、肝臟和腎臟的

10、休藥期結(jié)果分別為4.919d、4.759d和3.369d。雞按推薦劑量飲水給藥,建議恩諾沙星鈉可溶性粉的休藥期至少為5d。
　　 3.3鹽酸恩諾沙星可溶性粉在雞的殘留消除規(guī)律:在0休藥期時(shí),測(cè)得的肌肉、肝臟和腎臟中的恩諾沙星標(biāo)志殘留物的殘留量分別為(8.038±2.074)mg/kg、(12.678±3.667)mg/kg和(3.273±0.879)mg/kg;肌肉、肝臟、腎臟組織中的恩諾沙星標(biāo)志殘留物的殘留量在停藥第9 d時(shí)降

11、均至相應(yīng)的MRL以下。實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)用WT1.4計(jì)算軟件擬合,肌肉、肝臟和腎臟的休藥期結(jié)果分別為9.739d、9.549d和7.119d。雞按推薦劑量飲水給藥,建議鹽酸恩諾沙星可溶性粉的休藥期至少為10d。
　　 結(jié)果表明,三種恩諾沙星可溶性粉劑按推薦劑量飲水給藥,在0休藥期時(shí),均顯示殘留量肝臟最高,肌肉其次,腎臟最低,肝臟消除亦最慢。三種藥物殘留消除存在差異,乳酸恩諾沙星可溶性粉休藥期至少為8d;恩諾沙星鈉可溶性粉休藥期至少為5d;