非酒精性脂肪性肝炎腸組織MIF和MMP-2表達的研究.pdf

1、目的：采用高脂飲食及腹腔注射氧四環(huán)素建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholicsteatohepatitis, NASH）模型，觀察并檢測甘氨酸在非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholicsteatohepatitis, NASH）發(fā)生發(fā)展過程中對腸組織巨噬細胞移動抑制因子（MIF）和基質(zhì)金屬蛋白-2 （MMP-2）表達的影響，探討腸源性內(nèi)毒素血癥（IETM）與腸免疫屏障的關系及其在非酒精性脂肪型肝炎發(fā)生發(fā)展過程中的作用

2、。
　　 方法：選用雄性SD大鼠36只，清潔級，環(huán)境溫度適宜，自由飲食，自然光照,適應性飼養(yǎng)一周后隨機分成三組,每組12只:①模型組：（普通飼料、 15％豬油、2％膽固醇、0.5％膽酸鈉、5％蛋黃粉），每五天按10mg/100g 劑量給予氧四環(huán)素（每1ml 針劑含氧四環(huán)素20mg）腹腔注射②對照組:（普通飼料喂養(yǎng)），在模型組注射氧四環(huán)素的同一時間，給予相同體積的生理鹽水腹腔注射③治療組:（普通飼料、15％豬油、2％膽固醇、0.5

3、％膽酸鈉、5％蛋黃粉、5％甘氨酸），并每五天按10mg/100g 劑量給予氧四環(huán)素（每1ml 針劑含氧四環(huán)素20mg）腹腔注射，于第4,8周末分別從上述三組中取6只大鼠處死，測量體重和肝重，計算肝指數(shù)；取肝臟標本做HE 染色、觀察肝臟的形態(tài)學變化；按照實驗要求采集腹主動脈血檢測血漿中腫瘤壞死因子-α、轉(zhuǎn)氨酶(ALT、AST)、白介素-6、白介素-10和門靜脈血漿內(nèi)毒素(ET)水平；應用免疫組化的方法檢測同期模型組與對照組、治療組與模型組

4、腸組織中MIF和MMP-2表達的變化。
　　 結(jié)果：（1）各組大鼠體重均呈進行性升高，模型組肝指數(shù)、大鼠體重均高于同期對照組(P<0.05)，并隨時間的延長呈升高趨勢；（2）4周時模型組與同期對照組相比ALT與AST 明顯升高（P<0.05），治療組均明顯低于同期模型組（P<0.05）；（3）4周起與同期對照組相比，模型組大鼠TNF-α，ET 均有升高（P<0.05），8周治療組大鼠TNF-α和ET與同期模型組比較明顯降低（P<

5、0.05）；（4）8周時模型組大鼠與對照組相比IL-6 明顯升高（P<0.05），治療組明顯低于同期模型組（P<0.05）；4周起模型組IL-10開始降低，且與對照組相比，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；（5）免疫組化結(jié)果顯示模型組腸組織MIF、MMP-2的表達量與同期對照組相比均有統(tǒng)計學差異（P<0.05）；治療組MIF、MMP-2的表達量與同期模型組相比差異有統(tǒng)計學意義；（6）直線相關分析結(jié)果：TNF α與門靜脈血ET 相關性分析

6、：呈高度正相關(P<0.01)；MIF、MMP-2與門靜脈血ET 相關性分析：呈正相關 (P<0.01)；MIF與MMP-2 相關性分析：呈高度正相關(P<0.01)。
　　 結(jié)論：1、在采用高脂飲食及腹腔注射氧四環(huán)素制備大鼠NASH 模型中伴有IETM的形成。2、ET水平的增高與腸組織MIF及MMP-2表達增高呈正相關，可能提示IETM的形成與腸免疫屏障受損有關;3、甘氨酸可拮抗內(nèi)毒素，降低了腸組織MIF和MMP-2的表達，減