2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究中藥復方肺癆康治療耐異煙肼肺結核小鼠的分子機制,從分子生物學角度,探討其治療作用與inhA基因突變之間的關系,為中醫(yī)藥治療耐藥肺結核提供一些研究思路。
  方法:本研究先取80只昆明種小鼠,尾靜脈注射法建立耐異煙肼肺結核動物模型,隨機分為模型組、異煙肼組、肺癆康組及異煙肼聯合肺癆康組,分別給予生理鹽水、異煙肼、肺癆康、異煙肼聯合肺癆康灌胃治療56天;選取20只同種小鼠,尾靜脈注射H37RV標準結核分枝桿菌菌懸液,建立H3

2、7RV標準菌小鼠模型,以生理鹽水灌胃56天;選取20只同種小鼠,尾靜脈注射生理鹽水作為空白組,以生理鹽水灌胃56天;比較各組小鼠一般體征及治療前后體重變化,56天后取小鼠肺臟組織進行細菌培養(yǎng);肉眼及光鏡下觀察各組小鼠肺臟組織病理變化;利用全基因組重測序技術對治療后小鼠肺組織中結核桿菌基因組DNA進行重測序,以標準菌株(H37RV)為參考序列,篩選對比分析;采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件對實驗中的計量、計數資料進行統(tǒng)計學分析,采用bwa(v

3、ersion0.7.8)、samtools、Picard等軟件處理全基因測序后的數據并進行堿基與基因組表達結果的比對。
  結果:通過對比治療前后的的小鼠體重變化,各組小鼠治療前體重組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),治療后各自小鼠體重組間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),標準菌株組與模型組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),異煙肼組、肺癆康組、聯合用藥組與模型組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);肉眼觀察小鼠肺部形態(tài)發(fā)

4、現標準菌株組和模型組肺部形態(tài)有明顯改變,每只小鼠肺組織均有大小不等結節(jié),異煙肼組、肺癆康組、聯合用藥組僅僅有部分小鼠肺臟現有結節(jié),比較各組小鼠結節(jié)數差異性,標準菌株與模型組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);異煙肼組與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);肺癆康組與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);聯合用藥組與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),肺癆康、模型組、聯合用藥組之間差異性無統(tǒng)計學意義(P>0.05);光鏡

5、下觀察治療組肺臟炎癥反應較模型組明顯減輕;研究發(fā)現與結核桿菌耐藥基因inhA基因突變相關的可能的突變堿基位點有三個,分別位于基因組的第1673425、1676290、1678706堿基位置,對應堿基C、C、A突變?yōu)門、A、C。該位置堿基突變分別位于編碼序列上游、下游、下游,基因組編碼序列的改變分別在777、1279、3695。對比各組堿基位點,標準菌株這三個位置堿基與參考堿基一致,模型組、肺癆康組、異煙肼組、聯合組耐異煙肼結核桿菌與in

6、hA對應堿基均有突變,且突變位置、基因組編碼序列、基因一致。
  結論:1.肺癆康治療耐異煙肼肺結核模型小鼠,能顯著改善小鼠的一般體征及組織病變,減輕肺部炎癥反應,為臨床應用治療耐藥肺結核提供更多依據;2.通過全基因測序發(fā)現一些新的與inhA基因突變相關位點,分別位于編碼序列上游、下游、下游,基因組編碼序列的改變分別在777、1279、3695;3.初步研究發(fā)現肺癆康抗耐異煙肼肺結核的分子機制與誘發(fā)inhA基因回復突變關系不明顯,

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