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1、纂515CloningofUPstreamRegionof心尹51genefromUstilt珍0maydisandAnalysisbyBioinformatiesA了幾叮扮Submitt6dinPartialFu價(jià)lIi陰entoftheRequirements矛brthe勝5.DegrreeinBtochemis仰and幾rolecularBio匆邵夕ByChenLiPostgraduateProgramCollegeofLifeS
2、cienceCentralChinaNormalUniversitySuPervisor:DeLiLiuAcademiCTitle:ProfeSS0rSignatureAPProvedMay,2010⑧~S1sE.eoliBLZI(DE3)進(jìn)行高效表達(dá)(37oC,1.0nunoljLIPTG誘導(dǎo)36小時(shí))。結(jié)果顯示:分別在可見光和紫外光下觀測,轉(zhuǎn)化pETUm一GFP的大腸桿菌菌液較轉(zhuǎn)化pETGFP的菌液發(fā)出的綠色熒光亮度更高。通過構(gòu)建的
3、重組質(zhì)粒pGL一um轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞后檢測報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄活性。雙熒光素酶報(bào)告基因檢測系統(tǒng)對其表達(dá)情況顯示,構(gòu)建的pGL一Um啟動子質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組比pGL3一basic空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組的熒光素酶高出2.2倍,說明cyP51基因上游啟動子在細(xì)胞內(nèi)啟動了熒光素酶基因的表達(dá)并增強(qiáng)表達(dá)效果。本文分析研究了玉米黑粉菌cyP51基因上游啟動子序列的結(jié)構(gòu)功能,為后續(xù)工作將采用突變截短技術(shù)對獲得的上游序列做進(jìn)一步診釋也將為新型高效抗真菌新藥的研發(fā)和篩選提供理論依
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