黑木耳多糖分離純化及其對(duì)大豆分離蛋白糖基化的研究.pdf

1、本研究以黑木耳(Auricularia auricular)為試驗(yàn)原料，采用亞臨界水萃取法提取黑木耳多糖，通過響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝條件，并分析三氯乙酸法、酶解法、sevage法和AB-8樹脂法等脫除黑木耳多糖中蛋白質(zhì)的效果，得到脫蛋白的最佳工藝條件，在此基礎(chǔ)上，利用黑木耳多糖和大豆分離蛋白進(jìn)行復(fù)合，優(yōu)化糖基化反應(yīng)條件，并初步探討了黑木耳多糖-大豆分離蛋白復(fù)合物的功能特性，為黑木耳多糖的綜合利用及工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：

2、
　　1.根據(jù)Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，在單因素的試驗(yàn)基礎(chǔ)上采用響應(yīng)面分析法優(yōu)化工藝條件，得到亞臨界水萃取法提取木耳多糖的最佳工藝條件為:提取溫度152.31℃，提取時(shí)間26.07min，料液比130.79∶1mL/g，提取壓力1.0 MPa，此時(shí)得到的木耳多糖提取率為24.51％。同時(shí)，將優(yōu)化的亞臨界水萃取法與傳統(tǒng)的水浸提法、酶提取法、微波和超聲波輔助法進(jìn)行比較，結(jié)果表明黑木耳多糖的提取率較高，提取時(shí)間短，并且綠色環(huán)保

3、，適合工業(yè)化生產(chǎn)以及應(yīng)用在食品藥物中。
　　2.為了得到黑木耳多糖的最佳脫蛋白工藝，用三氯乙酸法、sevage法、酶解法、酶解-sevage法、等電點(diǎn)法、酶解-等電點(diǎn)法和AB-8樹脂等7種方法處理黑木耳多糖，其蛋白脫除率分別為76.85％、72.17％、72.42％、76.48％、50.71％、62.24％和78.37％，其中AB-8樹脂對(duì)蛋白質(zhì)的脫除效果最好，通過響應(yīng)面法對(duì)其進(jìn)行工藝優(yōu)化，結(jié)果表明:上樣濃度為2.07mg/mL、

4、吸附時(shí)間為2.06h、固液比為1∶4.87時(shí)蛋白脫除率最高，為81.00％，此時(shí)多糖回收率為83.13％;并分析比較了脫除蛋白質(zhì)前后黑木耳多糖的體外抗氧化性，發(fā)現(xiàn)黑木耳多糖脫蛋白后其體外抗氧化活性有所增加，羥基自由基清除率提高32.36％，DPPH清除率最高為脫蛋白前的1.12倍，而還原能力為脫蛋白前的1.89倍。
　　3.采用Box-Behnken模型優(yōu)化黑木耳多糖-大豆蛋白復(fù)合物的制備工藝，優(yōu)化后的工藝參數(shù)為:料液比40∶1(

5、m∶V)、pH9.21、溫度92.88℃、糖與蛋白質(zhì)量比4.18∶1。并分析比較了黑木耳多糖-大豆蛋白復(fù)合物和普通大豆蛋白的功能特性，結(jié)果表明黑木耳多糖-大豆蛋白復(fù)合物的乳化活性、乳化穩(wěn)定性增加，與大豆蛋白相比分別增加10.75倍和6.15倍，同時(shí)黑木耳多糖-大豆蛋白復(fù)合物的溶解度在pH2～10范圍內(nèi)溶解度顯著高于大豆蛋白，且熱穩(wěn)定性提高了9.24倍。黑木耳多糖與大豆蛋白復(fù)合后顯著改善了蛋白質(zhì)的功能特性，為黑木耳多糖廣泛的工業(yè)化應(yīng)用奠定