鮑曼不動桿菌plsC與abrP介導(dǎo)替加環(huán)素耐藥機(jī)制的研究.pdf

1、目前，多重耐藥鮑曼不動桿菌已成為臨床抗感染治療面臨的一大挑戰(zhàn)。由于替加環(huán)素已顯示對其具有很好的抗菌活性，因此其在治療多重耐藥鮑曼不動桿菌感染中倍受關(guān)注。然而，隨著替加環(huán)素的廣泛使用，臨床中對替加環(huán)素耐藥的鮑曼不動桿菌已不斷被分離。目前，現(xiàn)有耐藥機(jī)制并不能完全解釋臨床菌株對替加環(huán)素耐藥的原因，本研究將從三部分逐步深入探討鮑曼不動桿菌對替加環(huán)素耐藥的新機(jī)制。
　　第一部分主要對鮑曼不動桿菌19606-T8通過替加環(huán)素體外連續(xù)選擇試驗，

2、獲得替加環(huán)素耐藥菌株19606-M24。通過對菌株進(jìn)行全基因組測序及應(yīng)用比較基因組學(xué)發(fā)現(xiàn)三個突變可能涉及替加環(huán)素耐藥的發(fā)生，包括編碼假設(shè)蛋白基因的同義突變，基因plsC與omp38的移碼突變?；匮a(bǔ)野生型plsC基因可以恢復(fù)替加環(huán)素敏感性，證明plsC基因的移碼突變與替加環(huán)素耐藥相關(guān)。況且，我們通過透射電子顯微鏡與流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)基因plsC突變可以導(dǎo)致菌株細(xì)胞膜改變。此外，我們也評估了plsC基因具有約8％的適應(yīng)性代價。總之，基因pl

3、sC在鮑曼不動桿菌對替加環(huán)素耐藥的過程中發(fā)揮重要作用，該基因微弱的適應(yīng)性代價有可能是造成替加環(huán)素耐藥的鮑曼不動桿菌流行的重要原因。
　　第二部分主要鑒定了鮑曼不動桿菌介導(dǎo)替加環(huán)素敏感性降低的基因abrP，第一次闡明了鮑曼不動桿菌abrP基因涉及替加環(huán)素敏感性降低表型及適應(yīng)性代價。此外，失活abrP也可以降低其他抗菌藥物的敏感性，例如四環(huán)素、多西環(huán)素、米諾環(huán)素、氯霉素和磷霉素。應(yīng)用透射電子顯微鏡與流式細(xì)胞術(shù)檢測證實abrP可以影響鮑

4、曼不動桿菌細(xì)胞膜的改變。通過體外競爭與非競爭實驗證實了基因abrP具有適中的適應(yīng)性代價?？傊@些結(jié)果顯示基因abrP在鮑曼不動桿菌抗菌藥物敏感性與適應(yīng)性代價中發(fā)揮重要作用，這些抗菌藥物敏感性的改變很可能是鮑曼不動桿菌細(xì)胞膜滲透性改變的結(jié)果。
　　第三部分探討了鮑曼不動桿菌暴露于亞抑制濃度替加環(huán)素的情況下，基因在轉(zhuǎn)錄組水平的變化。研究發(fā)現(xiàn)，MFS家族的外排泵及多個涉及壓力與藥物耐藥反應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子在暴露替加環(huán)素時出現(xiàn)上調(diào)。乙酸苯酯分