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1、本文研究了生物胺(biogenic amine,BA)在對(duì)蝦酚氧化酶原系統(tǒng)激活過(guò)程中的作用機(jī)制。主要探討了①3種生物胺對(duì)凡納濱對(duì)蝦Litopenaeus vannamei血細(xì)胞數(shù)量和酚氧化酶原胞吐的影響;②多巴胺(dopamine,DA)對(duì)凡納濱對(duì)蝦血細(xì)胞作用途徑的初步研究;③注射多巴胺、病原菌(Vibrio alginolyticus)對(duì)凡納濱對(duì)蝦血淋巴生物胺含量和酚氧化酶原系統(tǒng)的影響;④注射多巴胺、病原菌對(duì)凡納濱對(duì)蝦免疫力的影響。主
2、要結(jié)果如下: 1.3種生物胺對(duì)凡納濱對(duì)蝦血細(xì)胞數(shù)量和酚氧化酶原胞吐的影響 多巴胺、去甲腎上腺素(norepinephrine,NE)和5-羥色胺(serotonin,5-HT)對(duì)凡納濱對(duì)蝦三類血細(xì)胞、總血細(xì)胞數(shù)量、血細(xì)胞酚氧化酶原活力和血細(xì)胞釋放的酚氧化酶活力影響顯著(P<0.05),且具有時(shí)間劑量效應(yīng)。0.5、1.0和3.0μM的3種生物胺作用20min均會(huì)引起對(duì)蝦三類血細(xì)胞數(shù)量、總血細(xì)胞數(shù)量和血細(xì)胞酚氧化酶原活力顯著
3、降低,血細(xì)胞釋放的酚氧化酶活力顯著升高。相同濃度作用相同時(shí)間時(shí),三種生物胺對(duì)上述指標(biāo)的影響從大到小依次為多巴胺、去甲腎上腺素和5-羥色胺。對(duì)照組上述各指標(biāo)在實(shí)驗(yàn)時(shí)間內(nèi)均無(wú)明顯變化。 2.多巴胺對(duì)凡納濱對(duì)蝦血細(xì)胞作用途徑的初步研究 1μM多巴胺作用20min后,三類血細(xì)胞數(shù)量、總血細(xì)胞數(shù)量和血細(xì)胞酚氧化酶原活力顯著降低,血細(xì)胞釋放的酚氧化酶活力顯著升高(P<0.05)。在多巴胺作用前用10、100和500μM D1類多巴胺
4、受體拮抗劑劑SCH23390和D2類多巴胺受體拮抗劑劑舒必利單獨(dú)或混合孵育20min可顯著抑制(但并未完全抑制)多巴胺對(duì)三類血細(xì)胞數(shù)量、總血細(xì)胞數(shù)量、血細(xì)胞酚氧化酶原活力和血細(xì)胞釋放的酚氧化酶活力的影響(P<0.05)。 兩種受體拮抗劑對(duì)上述各指標(biāo)的作用具有劑量效應(yīng),隨作用濃度的增大,抑制效果更加明顯;相同濃度的SCH23390比舒必利抑制作用更強(qiáng);兩種受體拮抗劑混合作用比單獨(dú)使用一種效果顯著。 3.注射多巴胺、病原菌對(duì)
5、凡納濱對(duì)蝦血淋巴生物胺含量和酚氧化酶原系統(tǒng)的影響 注射50μl10-6 mol1-1、10-7 mol1-1多巴胺或6.0×105 cells ml-1、6.0×106 cellsml-1溶藻弧菌對(duì)凡納濱對(duì)蝦血淋巴中3種生物胺含量、三類血細(xì)胞和總血細(xì)胞數(shù)量、血細(xì)胞絲氨酸蛋白酶和酚氧化酶原活力、血淋巴酚氧化酶和蛋白酶抑制劑活力影響顯著(P<0.05),且具有時(shí)間劑量效應(yīng)。除多巴胺處理組的絲氨酸蛋白酶活力外,其余各指標(biāo)均呈峰值變化,
6、但是達(dá)到峰值和趨于穩(wěn)定的時(shí)間具有不同步性。 注射多巴胺、病原菌后凡納濱對(duì)蝦血淋巴中5-羥色胺含量變化趨勢(shì)相似,分別在1h、6h和3h前顯著升高,而多巴胺含量變化趨勢(shì)相反,分別在3h達(dá)到最高和最低值,注射多巴胺組去甲腎上腺素含量3h前顯著升高,而注射病原菌組則在1h時(shí)達(dá)到最大值,之后顯著下降。注射多巴胺或6.0×106 cells ml-1溶藻弧菌的凡納濱對(duì)蝦總血細(xì)胞數(shù)量均顯著降低,而6.0×105 cells ml-1溶藻弧菌處
7、理組三類血細(xì)胞和總血細(xì)胞數(shù)量在3h前顯著升高,之后緩慢下降,6h后趨于穩(wěn)定;大顆粒細(xì)胞比例在3h前略有升高;除多巴胺處理組的絲氨酸蛋白酶活力外,其余酶活各指標(biāo)分別在1-6h內(nèi)達(dá)到最高或最低值。穩(wěn)定后,除病原菌處理組的5-羥色胺含量,多巴胺和6.0×106病原菌處理組透明細(xì)胞、小顆粒細(xì)胞和總血細(xì)胞數(shù)量,多巴胺處理組絲氨酸蛋白酶活力明顯低于對(duì)照組外,其余各指標(biāo)與對(duì)照組差異不顯著。對(duì)照組上述各指標(biāo)在實(shí)驗(yàn)時(shí)間內(nèi)無(wú)顯著變化。 4.注射多巴
8、胺、病原菌對(duì)凡納濱對(duì)蝦免疫力的影響 注射10-6 mol1-1、10-7 mol1-1多巴胺或6.0×105 cells ml-1、6.0×106 cells ml-1溶藻弧菌對(duì)凡納濱對(duì)蝦血淋巴中3種生物胺含量、總血細(xì)胞數(shù)量、血細(xì)胞吞噬活力、血漿酚氧化酶活力、溶菌活力和血藍(lán)蛋白含量影響顯著。生物胺含量和總血細(xì)胞數(shù)量結(jié)果與3.中相同。 注射多巴胺或病原菌后,血細(xì)胞吞噬活力分別于6h和3h達(dá)到最小和最大值,并分別與注射劑量成
9、負(fù)相關(guān)和正相關(guān);注射多巴胺或6.0×106 cells ml-1溶藻弧菌后溶菌活力于3h達(dá)到最小值,6h后趨于穩(wěn)定,而6.0×105 cells ml-1溶藻弧菌處理組溶菌活力于3h前顯著升高;多巴胺和病原菌處理組酚氧化酶活力分別于6h和1h升到最高,12h、3h后趨于穩(wěn)定。注射多巴胺或病原菌后血藍(lán)蛋白含量分別于6h和3h達(dá)到最大和最小值,24h后保持穩(wěn)定。 穩(wěn)定后除多巴胺和6.0×106 cells ml-1病原菌處理組溶菌活
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