Carmal在T細胞受體引起NF-κB激活過程中作用和機制研究.pdf

1、基因敲除實驗證明新型的蛋白激酶C家族成員PKCθ是TCR-CD28共刺激引起的NF-κB轉錄因子活化信號傳導通路上必不可少的成分,但PKCθ是如何引起IKK激活的過程并不清楚.該文介紹我們使用體細胞突變(somaticmutagensis)的方法,克隆了一株人T白血病細胞Jurkat的突變細胞株JPM50.6.與Jurkat野生型不同,JPM50.6特異性地缺失表達細胞膜相關聯(lián)的鳥苷激酶蛋白家族(membrane associated

2、guanylate kinase,MAGUK)成員Carma1.在該論文的第二部分,我們的研究證明Carma1與細胞膜是組成性的結合在一起.Carma1分子MAGUK結構域中一個氨基酸的突變引起該分子與細胞膜相結合的功能的喪失,從而也失去了介導TCR引起的NF-κB活化的功能,說明這種與細胞膜結合的性能對Carma1的生理功能是非常重要的.盡管許多MAGUK家族成員參與神經突觸的形成過程,Carma1的缺失并不影響T細胞免疫突觸的形成.

3、但是在Carma1缺失的JPM50.6突變細胞株中,TCR-CD28引起的信號傳導分子PKCθ,Bcl10,IKK向免疫突觸中的轉移完全消失,而Carma1于JPM50.6細胞中穩(wěn)定表達則可逆轉這一缺失.說明這些重要信號傳導分子向免疫突觸中的轉移完全依賴于Carma1.與此相一致,進一步的研究采用缺失Card域Carma1與Bcl10的融合分子能完全逆轉JPM50.6突變細胞株TCR-CD28共刺激引起的NF-κB活化的缺失.這些結果表