山東省食源性沙門(mén)氏菌監(jiān)測(cè)及分型研究.pdf

1、研究目的：通過(guò)對(duì)2003-2010年山東省食源性沙門(mén)氏菌監(jiān)測(cè)資料的分析，了解食品中沙門(mén)氏菌污染水平和特征，確定分離菌株的血清型分布和優(yōu)勢(shì)血清型，掌握食品沙門(mén)氏菌污染動(dòng)態(tài)變化，為有針對(duì)性的制定食品安全措施提供依據(jù)；了解山東省食源性沙門(mén)氏菌對(duì)抗生素的敏感程度，比較不同血清型沙門(mén)氏菌耐藥表型差異和多重耐藥分布，建立食源性沙門(mén)氏菌耐藥圖譜數(shù)據(jù)庫(kù)；應(yīng)用PFGE技術(shù)對(duì)食源性沙門(mén)氏菌進(jìn)行分子生物學(xué)分析，比較不同來(lái)源沙門(mén)氏菌同源性，對(duì)山東省食源性沙門(mén)氏

2、菌進(jìn)行分子分型，建立沙門(mén)氏菌PFGE指紋圖譜數(shù)據(jù)庫(kù)，為沙門(mén)氏菌食品污染及食物中毒溯源提供技術(shù)保障。
　　 研究方法：采用GB4789.4-2003標(biāo)準(zhǔn)方法和全國(guó)食源性致病菌檢測(cè)方法，對(duì)2003-2010年山東省8個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)8類(lèi)食品進(jìn)行沙門(mén)氏菌監(jiān)測(cè)，分離鑒定菌株并進(jìn)行血清學(xué)分型；采用美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所CLSI標(biāo)準(zhǔn)推薦微量肉湯稀釋法對(duì)食源性沙門(mén)氏菌進(jìn)行16種抗生素敏感實(shí)驗(yàn)，質(zhì)控菌株為coli.ATCC25922；利用限制性?xún)?nèi)切

3、酶Xba I酶切沙門(mén)氏菌基因組，進(jìn)行脈沖場(chǎng)凝膠電泳，通過(guò)BioNumerics6.1對(duì)電泳圖譜進(jìn)行同源性比較。
　　 研究結(jié)果：2003-2010年，監(jiān)測(cè)生牛奶、生豬肉、生羊肉、生牛肉、生禽肉、散熟肉、蔬菜、水產(chǎn)品等八類(lèi)食品3335份，檢出沙門(mén)氏菌96株，檢出率為2.88％，其中，生禽肉和生豬肉的沙門(mén)氏菌檢出率最高，分別達(dá)到7.44％和7.37％，生牛奶中未檢出沙門(mén)氏菌，各年度沙門(mén)氏菌檢出率以2010年最高，為4.48％，200

4、6年最低，為1.47％，其他各年度沙門(mén)氏菌檢出率依次為，2009年4.38％、2008年3.79％、2007年2.46％、2004年2.07％、2003年1.69％、2005年1.61％，各監(jiān)測(cè)點(diǎn)以臨沂檢出率最高6.67％，聊城最低0.74％；檢出的96株沙門(mén)氏菌，確定血清型94株，分屬4個(gè)群6個(gè)亞群15種血清型。其中腸炎(S.Entertidis)和德比(S.Derby)為優(yōu)勢(shì)血清型，分別檢出51株(53.13％)和18株(18.75

5、％)。
　　 126株不同來(lái)源沙門(mén)氏菌(食品監(jiān)測(cè)菌株96株、雞專(zhuān)項(xiàng)菌株15株和食物中毒食品檢出菌株15株)對(duì)14種抗生素均有不同程度的耐藥，產(chǎn)生耐藥表型39個(gè)；對(duì)頭孢吡肟(5.37％)耐藥率最低，對(duì)萘啶酸的耐藥率最高(達(dá)61.90％)，其次為四環(huán)素(33.33％)、氨芐青霉素(31.75％)、磺胺嘧啶(26.19％)；耐藥分布以萘啶酮酸單耐菌株和全敏菌株為主，分別占35.71％和26.19％，10耐及以上菌株占10.52％；腸炎

6、沙門(mén)氏菌菌多重耐藥菌株三個(gè)時(shí)間段呈上升趨勢(shì)。
　　 PFGE指紋圖譜聚類(lèi)分析顯示，沙門(mén)氏菌分屬31個(gè)基因型別，72個(gè)PFGE基因指紋圖譜，其中腸炎沙門(mén)氏菌可分為12個(gè)型別，40種PFGE指紋圖譜，同源性在51.24％-100％之間，其中XB17型腸炎沙門(mén)氏菌39株，占69.42％，XB20和XB22型為4株，占7.02％，XB23型3株，占5.26％，XB21型2株，占3.51％，其余型別均為1株。食物中毒事件中檢出的7株腸炎沙

7、門(mén)氏菌，均屬于XB17型，其中6株存在與食品監(jiān)測(cè)檢出沙門(mén)氏菌相同PFGE指紋圖譜，剩余菌株與其他圖譜相似度也在90％以上。
　　 結(jié)論：監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，山東省監(jiān)測(cè)食品沙門(mén)氏菌污染狀況較為嚴(yán)重，呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)，優(yōu)勢(shì)血清型為腸炎和德比。沙門(mén)氏菌菌株以單耐和敏感為主，但在食源性動(dòng)物飼養(yǎng)中廣泛應(yīng)用的萘啶酮酸、四環(huán)素、青霉素等抗生素耐藥率較高，多重耐藥菌株特別耐10種以上抗生素的菌株開(kāi)始逐年增加。沙門(mén)氏菌PFGE分子分型型別和圖譜種類(lèi)，以