金絲桃苷、淫羊藿苷對(duì)大鼠卵巢顆粒細(xì)胞CYP17、CYP19表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的:研究中藥單體金絲桃苷、淫羊藿苷是否促進(jìn)大鼠卵巢顆粒細(xì)胞增殖并促進(jìn)其分泌孕酮和雌二醇，同時(shí)，研究金絲桃苷、淫羊藿苷對(duì)顆粒細(xì)胞中雌二醇、孕酮合成的關(guān)鍵酶基因CYP17、CYP19的調(diào)控，以期闡明金絲桃苷、淫羊藿苷調(diào)控大鼠卵巢顆粒細(xì)胞功能的機(jī)制。
　　方法:分離大鼠卵巢顆粒細(xì)胞，體外培養(yǎng)24h后于培養(yǎng)基中加入不同濃度的金絲桃苷、淫羊藿苷，繼續(xù)培養(yǎng)72h，通過(guò)MTT法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組卵巢顆粒細(xì)胞增殖率，繪制大鼠卵巢顆粒細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)

2、;酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)各組顆粒細(xì)胞培養(yǎng)液中的雌二醇、孕酮濃度，熒光實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)各組卵巢顆粒細(xì)胞CYP17、CYP19基因mRNA的表達(dá)水平;蛋白免疫印跡法檢測(cè)各組CYP17、CYP19蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:一定濃度的金絲桃苷、淫羊藿苷可明顯增加卵巢顆粒細(xì)胞數(shù)量(P＜0.05)，并促進(jìn)其雌二醇、孕酮的分泌(P＜0.05)，同時(shí)促進(jìn)CYP17、CYP19基因mRNA的表達(dá)(P＜0.05)。50ug/L為金絲桃苷促進(jìn)CYP1

3、7(P＜0.01)、CYP19(P＜0.01)表達(dá)的最佳濃度;10ug/L為淫羊藿苷促進(jìn)CYP17(P＜0.05)、CYP19(P＜0.01)表達(dá)的最佳濃度。蛋白免疫印跡法的結(jié)果與mRNA相一致。
　　結(jié)論:一定濃度的金絲桃苷、淫羊藿苷能夠促進(jìn)體外培養(yǎng)的大鼠卵巢顆粒細(xì)胞增殖，并促進(jìn)卵巢顆粒細(xì)胞分泌雌二醇及孕酮，同時(shí)促進(jìn)CYP17、CYP19 mRNA及的蛋白表達(dá)，說(shuō)明金絲桃苷、淫羊藿苷促進(jìn)顆粒細(xì)胞增殖，并促進(jìn)CYP17、CYP19