DEHP通過氧化應(yīng)激和Fasl途徑誘導(dǎo)GC-2spd細(xì)胞凋亡.pdf

1、目的:探討鄰苯二甲酸二乙基己酯(di-2-ethylhexyl phthalate，DEHP)對(duì)小鼠生精細(xì)胞（GC-2spd）凋亡的影響及其調(diào)控機(jī)制。
　　方法:通過體外培養(yǎng)小鼠生精細(xì)胞（GC-2spd）細(xì)胞，然后用不同濃度的DEHP(0，50，100，200μmol/L)染毒GC-2spd細(xì)胞，MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞存活率，AnnexinⅤ-FITC/PI雙染色法結(jié)合流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，熒光定量PCR法檢測(cè)凋亡相關(guān)基因如Fas

2、L，caspase-3，caspase-8的mRNA表達(dá)。Western blot檢測(cè)FasL，caspase-3，caspase-8的蛋白表達(dá)。分光光度計(jì)法測(cè)定GC-2spd細(xì)胞中丙二醛(MDA)含量，超氧化物歧化酶(SOD)活力和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力。
　　結(jié)果:隨著DEHP濃度的增加，GC-2spd細(xì)胞存活率逐漸下降，細(xì)胞凋亡率逐漸上升，其中100，200μmol/L劑量組凋亡率與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0

3、.05）。MDA的含量總體上升，超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)的活性不同程度的發(fā)生改變，其中GSH-PX的活性與對(duì)照組比較在50、100μmol/L劑量組降低顯著（P＜0.05），SOD活性在200μmol/L降低顯著(P＜0.05)。凋亡相關(guān)基因出現(xiàn)過表達(dá)或表達(dá)不足， Fasl mRNA和蛋白表達(dá)均出現(xiàn)上升，其中100、200μmol/L染毒組與對(duì)照組差異明顯(P＜0.05); caspase-8 mRN