牛泡沫病毒BBet蛋白多聚化功能的初探.pdf

1、泡沫病毒（foamy virus, FV）在分類上屬于反轉(zhuǎn)錄病毒科、泡沫病毒亞科、泡沫病毒屬，同人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus, HIV）以及人T細(xì)胞白血病病毒（human T-cell leukemia virus, HTLV）一樣，屬于復(fù)雜的反轉(zhuǎn)錄病毒。病毒基因組的兩端為長末端重復(fù)序列（long terminal repeat, LTR），具有啟動子和增強(qiáng)子的雙重功能，中間為病毒的三種結(jié)構(gòu)

2、蛋白的基因gag，pol，env，在env基因和3’ LTR之間還存在著一個內(nèi)部啟動子IP（internal promoter），負(fù)責(zé)啟動env基因和3’ LTR之間非結(jié)構(gòu)基因tas，bet等的轉(zhuǎn)錄。
　　Tas作為泡沫病毒最重要的調(diào)控蛋白，它通過結(jié)合到病毒的LTR和IP上，首先促進(jìn)自身蛋白的表達(dá)進(jìn)而激活結(jié)構(gòu)蛋白的表達(dá)。Bet作為泡沫病毒的另一個非結(jié)構(gòu)蛋白，其研究熱度不亞于Tas蛋白。Bet廣泛存在于FV感染的細(xì)胞內(nèi)，但是對于FV

3、的Bet蛋白的功能卻不甚了解。目前最被人們接受的是Bet類似于HIV的Vif蛋白，可拮抗宿主的限制性因子APOBEC3。
　　本實(shí)驗(yàn)室以自己分離得到的牛泡沫病毒（bovine foamy virus, BFV）3026為材料，對BFV的BTas（BFV Tas）蛋白和BBet（BFVBet）蛋白進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)室前期的研究表明，BBet可以抑制BTas對自身LTR啟動子的激活。同時， BBet在感染的細(xì)胞內(nèi)可以呈現(xiàn)出多聚化的狀態(tài)。

4、
　　本文從BBet蛋白多聚化入手，界定其最小多聚化區(qū)域，結(jié)果發(fā)現(xiàn)第332~336位氨基酸在BBet蛋白多聚化中發(fā)揮重要作用，缺失這一區(qū)域，BBet多聚化水平明顯減弱了。免疫熒光實(shí)驗(yàn)證明BBetΔ332-336 aa同野生型相比，其細(xì)胞定位沒有明顯改變，仍然是核漿共定位；同時也構(gòu)建了缺失BBet多聚化位點(diǎn)的全長感染性克隆pBS-BFV BetΔ332-336 aa，發(fā)現(xiàn)BBet多聚化位點(diǎn)缺失后，病毒的復(fù)制能力下降了3倍左右。