慢加急性肝衰竭患者中乙型肝炎病毒前C-C區(qū)準(zhǔn)種分布研究.pdf

1、目的：研究慢加急性肝衰竭患者體內(nèi)HBV前C／C區(qū)準(zhǔn)種的分布特征，從HBV群體異質(zhì)性角度探討肝衰竭的發(fā)病機(jī)制。
　　 方法：選擇慢加急性肝衰竭患者10例為研究對(duì)象，以慢性乙型肝炎患者10例為對(duì)照組，取入組患者血清，抽提HBV DNA，巢式PCR擴(kuò)增HBV前C/C區(qū)基因，將PCR產(chǎn)物純化回收后進(jìn)行T-A克隆，通過基因測序方法得到陽性克隆的基因序列，應(yīng)用生物信息學(xué)方法分析比較慢加急性肝衰竭組和慢性乙型肝炎組之間準(zhǔn)種特征的差異。對(duì)于病毒

2、準(zhǔn)種的異質(zhì)性，可以從準(zhǔn)種復(fù)雜度和準(zhǔn)種多樣性兩方面進(jìn)行量化分析。為了明確準(zhǔn)種復(fù)雜度和多樣性與HBV DNA載量是否存在相關(guān)性，對(duì)其進(jìn)行person相關(guān)性分析。另外，構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹分析兩組間HBV進(jìn)化模式的差異。
　　 結(jié)果：兩組的HBV 準(zhǔn)種構(gòu)成情況不同，慢加急性肝衰竭患者組的準(zhǔn)種復(fù)雜度(包括核苷酸水平和氨基酸水平)和準(zhǔn)種多樣性（平均遺傳距離和平均非同義替換位點(diǎn)數(shù)）均大于慢性乙型肝炎患者組（P<0.05）。準(zhǔn)種復(fù)雜度和多樣性與HB

3、V 載量無明顯相關(guān)性（P>0.05）。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析結(jié)果顯示來自同一患者的序列聚在一起，僅少數(shù)序列會(huì)嵌合在其他患者的序列簇中；來自肝衰竭組的序列分支長度比慢乙肝組的長。
　　 結(jié)論：慢加急性肝衰竭組的準(zhǔn)種構(gòu)成情況較慢性乙型肝炎組復(fù)雜，肝衰竭組的準(zhǔn)種異質(zhì)性的量化指標(biāo)（包括準(zhǔn)種復(fù)雜度和多樣性）亦均大于慢性乙型肝炎組，復(fù)雜的HBV準(zhǔn)種分布特征可能導(dǎo)致HBV感染重癥化，乃至肝衰竭發(fā)生。
　　 HBV在慢加急性肝衰竭組和慢乙肝組表