IL-33增強免疫抑制小鼠抗感染能力及其機制的初步探討.pdf

1、環(huán)磷酰胺作為最常用的抗腫瘤化療藥之一，具有較強的免疫抑制作用，主要表現(xiàn)為外周血白細胞急劇減少。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）主要引發(fā)化膿性感染，其傳播速度快，具有多重耐藥性，致病性和病死率高。中性粒細胞由骨髓中造血干細胞分化而來，當病原微生物突破機體的物理屏障進入組織，中性粒細胞迅速趨化至感染部位，吞噬殺傷病原微生物。作為“警報素”和前炎性細胞因子，IL-33在細胞凋亡、分化以及多種免疫性疾病中發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。本課題通過建立小鼠

2、免疫抑制模型，觀察IL-33在免疫功能抑制機體中的抗感染作用及其機制，為臨床上免疫功能低下患者的治療提供新思路。
　　研究目的：
　　觀察IL-33在免疫功能抑制機體中的抗感染作用，并結(jié)合體外細胞實驗，探討IL-33對造血干細胞定向分化為中性粒細胞的影響，及IL-33對中性粒細胞殺菌、凋亡等生物學功能的調(diào)節(jié)機制。
　　研究方法：
　　使用環(huán)磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型，腹腔注射IL-33后感染MRSA，觀察小鼠存活

3、率、體內(nèi)中性粒細胞數(shù)目以及細菌數(shù)目的變化，初步評價IL-33的療效；用percoll分離中性粒細胞，從細胞水平探討IL-33對中性粒細胞趨化、吞噬、殺傷功能的影響；用流式細胞術(shù)檢測IL-33對中性粒細胞STAT3磷酸化、ROS生成及其凋亡的影響；免疫磁珠分選造血干細胞，使用細胞增殖標記物BrdU檢測IL-33對細胞增殖的作用，集落形成實驗檢測 IL-33對造血干細胞分化的影響；IL-33預處理的中性粒細胞采用粒細胞輸注法對免疫抑制小鼠進

4、行治療，探討其抗感染作用。
　　研究結(jié)果：
　　1、IL-33增強免疫抑制小鼠的抗感染能力
　　成功建立小鼠免疫抑制模型，IL-33治療后，免疫抑制小鼠在MRSA感染時存活率明顯提高，細菌負荷量降低，外周血中性粒細胞數(shù)目增多。免疫抑制小鼠中性粒細胞趨化、吞噬、殺傷功能均被抑制，而IL-33可提高中性粒細胞生物學功能。
　　2、IL-33通過促進造血干細胞分化為中性粒細胞
　　IL-33活化造血干細胞中JAK

5、2-STAT3信號通路，同時也激活STAT3下游的C/EBPβ-c-myc，IL-33通過JAK2-STAT3-C/EBPβ-c-myc促進造血干細胞增殖及定向分化為中性粒細胞。
　　3、IL-33增強中性粒細胞的功能
　　IL-33通過JAK2-STAT3信號調(diào)控中性粒細胞ROS的生成從而增強其殺菌功能，同時也通過JAK2-STAT3通路，上調(diào)Bcl-2表達，下調(diào)Bax表達，從而抑制中性粒細胞的凋亡。
　　4、輸注I