IFN-γ增強脂肪干細胞介導的免疫抑制機制.pdf

1、目的:脂肪源性干細胞(Adipose-derived stem cells，ADSCs)可以向成骨細胞和軟骨細胞、平滑肌細胞、心肌細胞和神經細胞等分化。脂肪干細胞由于具備易于獲取等特點，在組織工程中比骨髓間充質干細胞具有更加廣闊的應用前景，并因此成為當今的研究熱點之一。脂肪源性干細胞與間充質干細胞不但具有非常近似的生物學性質，而且在細胞表面標志譜的表達方面也十分接近。觀察脂肪干細胞的生長規(guī)律，鑒定其干細胞特性和免疫學性質。探索脂肪源性干

2、細胞表面白細胞抗原Ⅱ類分子的表達以及其免疫原性和免疫調節(jié)作用，并探討其具體機制是通過什么途徑誘導的。
　　方法:分離培養(yǎng)脂肪源性干細胞，并用γ型干擾素刺激，然后用流式細胞術檢測其表面免疫分子白細胞抗原Ⅱ的表達，實時熒光定量PCR和Western bolt分別檢測吲哚胺-2，3-雙加氧酶基因(Indoleamine2，3-dioxygenase，IDO)和蛋白的表達。脂肪源性干細胞單向刺激淋巴細胞，觀察細胞增殖情況。淋巴細胞用植物血

3、凝素(phytohaemagglutinin，PHA)刺激后，加入1×102-1×105脂肪源性干細胞，觀察淋巴細胞增殖情況;同時，1×102-1×105脂肪源性干細胞作為“第三者”細胞加入混合雙向淋巴細胞反應體系中，同樣觀察淋巴細胞增殖情況。
　　結果:所獲脂肪干細胞具有很強的體外增殖能力，其生長曲線呈“S”形;第3代脂肪干細胞表面CD29、CD44、CD90以及主要組織相容性抗原Ⅰ呈陽性表達，CD31、CD45、CD34及主要

4、組織相容性抗原Ⅱ呈陰性表達;未發(fā)現(xiàn)異體脂肪干細胞刺激淋巴細胞增殖。脂肪干細胞低表達白細胞抗原Ⅱ和吲哚胺-2，3-雙加氧酶，但在γ型干擾素IFN-γ刺激后，白細胞抗原Ⅱ和吲哚胺-2，3-雙加氧酶表達均明顯上調。脂肪源性干細胞不能刺激淋巴細胞增殖，但能抑制植物血凝素或異體淋巴細胞導致的淋巴細胞增殖，且脂肪源性干細胞與混合淋巴細胞共培養(yǎng)的上清中檢測到大量γ型干擾素的表達。
　　結論:提示所獲得細胞為脂肪干細胞，且具有較弱的排斥反應，有可