柴胡提取物對(duì)熱應(yīng)激奶牛的應(yīng)用效果及其抗熱應(yīng)激機(jī)制研究.pdf

1、本論文研究了柴胡提取物（BE）對(duì)熱應(yīng)激奶牛生產(chǎn)性能、血液激素、物質(zhì)代謝、血常規(guī)、抗氧化能力以及免疫能力的影響，并研究了柴胡皂苷a(SSa)和d(SSd)對(duì)熱誘導(dǎo)奶牛乳腺上皮細(xì)胞抗氧化酶活和熱休克蛋白基因表達(dá)豐度的影響，初步探明了BE緩解奶牛熱應(yīng)激的機(jī)理。為BE在熱應(yīng)激奶牛生產(chǎn)中的應(yīng)用提供了理論依據(jù)和參考。該研究主要從以下方面進(jìn)行：
　　1.不同劑量BE對(duì)熱應(yīng)激奶牛生產(chǎn)性能和血液基礎(chǔ)代謝的影響：試驗(yàn)根據(jù)產(chǎn)奶量（37.5±1.8kg/

2、d）、泌乳天數(shù)（75±15 d）以及胎次（1.7±0.4）等相近的原則將40頭荷斯坦奶牛隨機(jī)分為4個(gè)處理組，每組10頭，分別飼喂4種不同的處理日糧，即在基礎(chǔ)日糧中分別添加0、0.25、0.5和1.0 g/kg的柴胡提取物（DM基礎(chǔ)），試驗(yàn)期10周。試驗(yàn)牛只采用栓系式飼養(yǎng)模式，單獨(dú)飼喂。試驗(yàn)期間牛舍每天平均THI均大于72，因此，該試驗(yàn)是在熱應(yīng)激條件下完成的。結(jié)果表明，0.5 g/kgBE顯著降低了奶牛的RR（P<0.05）；不同劑量的B

3、E均降低了奶牛的RT，其中以中午時(shí)刻效果最顯著（P<0.01）；BE提高了熱應(yīng)激奶牛的DMI（P<0.05），0.25和0.5 g/kg的BE劑量提高奶牛的產(chǎn)奶量（P<0.05）。
　　BE降低了熱應(yīng)激奶牛血液中COR濃度（P<0.05），提高了T3、PRL、GH和LEP濃度（P<0.05），有降低GLU濃度的趨勢(shì)（P<0.1），但是對(duì)血清中T4、INS、NPY、IGF-I和HSP70含量沒(méi)有顯著影響。BE添加組顯著提高了奶牛血液

4、中TP含量（P<0.05），但是對(duì)Glu、NEFA、TG、TC、LDL-C和HDL-C沒(méi)有顯著影響（P>0.05）。0.25 g/kg的BE顯著增加了熱應(yīng)激奶牛血液中ALB的含量（P<0.05），0.25和0.5 g/kg的BE顯著降低了熱應(yīng)激奶牛血液中BUN的含量（P<0.05）。BE添加組顯著提高了熱應(yīng)激奶牛血液中K+（P<0.05），但不影響Mg2+的濃度（P>0.05）。0.5和1.0 g/kg BE提高了熱應(yīng)激奶牛血液中Na+

5、和Ca2+的濃度（P<0.05），1.0 g/kg BE降低了血液中P的濃度（P<0.05）。飼喂0.5 g/kgBE提高了血液中Cl含量（P<0.05）。
　　BE對(duì)WBC、MCV、MCHC、PLT和MPV的含量無(wú)顯著影響。0.5 g/kg BE提高了RBC、HGB、HCT和RDW的含量（P<0.05）。1.0 g/kg BE提高了MCH含量（P<0.05）。0.25 g/kg BE提高了熱應(yīng)激奶牛的SOD和GSH-Px活性（P

6、<0.05）。添加BE有提高奶牛血液中T-AOC濃度和降低MDA含量的趨勢(shì)，但是差異不顯著（P>0.05）。0.25和0.5 g/kg BE提高了熱應(yīng)激奶牛血液中IgA、IgG、IL-2、IL-4和IL-6的含量（P<0.05）；但是，BE對(duì) IgM和 TNF-α的含量以及T淋巴細(xì)胞亞群CD4+、CD8+百分含量和CD4+/CD8+的比值無(wú)顯著影響（P>0.05）。
　　2.研究柴胡皂苷 a(SSa)和 d(SSd)對(duì)熱誘導(dǎo)奶牛乳

7、腺上皮細(xì)胞抗氧化酶活和熱休克蛋白家族基因表達(dá)的影響：以38℃作為對(duì)照組，以培養(yǎng)基中添加0、0.1、1.0μmo l/L的SSa和0、0.01、0.1μmo l/LSSd作為處理組，42℃處理1、4、8、12和24h，檢測(cè)奶牛乳腺上皮細(xì)胞中SOD、GSH-P x和C AT活性，熱休克蛋白家族基因表達(dá)及細(xì)胞培養(yǎng)基中MDA的含量。結(jié)果表明：42℃不同處理時(shí)間細(xì)胞的SOD、GSH-Px和CAT活性下降（P<0.05），MDA含量升高（P<0.0

8、5）。與42℃對(duì)照組相比，不同皂苷添加組能提高細(xì)胞中SOD、GSH-P x和C AT活性，降低細(xì)胞培養(yǎng)基中 MDA含量，在熱處理前4h，細(xì)胞中酶活活性提高（P<0.05），12h后，0.01和0.1μmol/LSSd劑量組MDA含量下降（P<0.05）。熱休克轉(zhuǎn)錄因子HSF-1和熱休克蛋白基因HSP27和HSP70在高溫處理前4h表達(dá)上調(diào)（P<0.05），HSP90的mRNA表達(dá)在熱處理8h后上調(diào)（P<0.05）。熱處理前4h時(shí)，SSa

9、和SSd組HSP70和HSP90基因的mRNA轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)（P<0.05），熱處理1h時(shí)，SSa和SSd組HSP27基因的mRNA轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)（P<0.05），SSa和SSd組的HSF-1基因的mRNA轉(zhuǎn)錄水平在熱處理8h時(shí)較38℃和42℃組細(xì)胞的HSF-1基因表達(dá)豐度上調(diào)（P<0.05）。因此，SSa和SSd提高了熱應(yīng)激奶牛乳腺上皮細(xì)胞SOD、GSH-P x和C AT含量，顯著降低了 MDA含量，并且提高了熱休克蛋白家族基因的表達(dá)豐度