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1、 本研究目的在于揭示與奶牛熱應(yīng)激相關(guān)的細(xì)胞免疫調(diào)控及分子機(jī)理。通過(guò)全血自動(dòng)分析儀分析熱應(yīng)激奶牛外周的各項(xiàng)生理指標(biāo);流式細(xì)胞術(shù)分析熱應(yīng)激奶牛外周淋巴細(xì)胞的細(xì)胞周期及凋亡率;半定量RT-PCR分析外周淋巴細(xì)胞HSP70mRNA、HSF1mRNA、Bcl-2mRNA和Bax-αmRNA基因表達(dá)水平;熒光定量PCR分析Bax-αmRNA基因表達(dá);PCR-SSCP技術(shù)分析HSP70基因5'-側(cè)翼區(qū)SNPs;pET-32a-c(+)表達(dá)bHSP7
2、0蛋白,并分析了了bHSP70生物活性。研究結(jié)果如下: 1.熱應(yīng)激對(duì)奶牛外周血各項(xiàng)生理指標(biāo)的影響 2.流式細(xì)胞術(shù)分析熱應(yīng)激對(duì)奶牛外周淋巴細(xì)胞周期及凋亡率 3.熱應(yīng)激奶牛外周淋巴細(xì)胞HSP70mRNA、HSF1mRNA、Bcl-2mRNA和Bax-αmRNA基因表達(dá)水平相對(duì)定量RT-PCR分析用半定量RT-PCR分別分析日平均氣溫分別為37.5℃(高溫)、26.5℃(臨界高溫)和5.5℃(對(duì)照)條件下奶牛外周中HSP70mR
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