去氨多重乳液吸附腸道氨治療肝性腦病的研究.pdf

1、背景:肝性腦病(hepaticencephalopathy，HE)為影響肝病預(yù)后的嚴(yán)重并發(fā)癥，該病的發(fā)病機(jī)制尚不明確。迄今為止，該病尚無(wú)特異性的治療方法，近年來(lái)不斷有學(xué)者提出新的治療策略，但總體臨床治療療效尚待進(jìn)一步驗(yàn)證。本研究通過(guò)考察載檸檬酸的去氨多重乳液(CitricAcid-loadedMultipleEmulsionforRemovalofAmmonia，CA-ME-RA)體外及體內(nèi)除氨率、胃腸道穩(wěn)定性及治療肝性腦病的療效，并初

2、步研究其藥物副作用，期望為HE的防治甚至其他腸道毒素的清除提供新的方法。
　　 方法:1、將親油性表面活性劑(span80，AbilEM90)與石蠟混合，后滴加濃度為0.1mol/l的檸檬酸溶液，用高速乳化劑（轉(zhuǎn)速為11000rpm）攪拌制備成油包水乳液，將親水性表面活性劑(Brij35)溶于水中，滴加制備好的油包水乳液，用機(jī)械攪拌（轉(zhuǎn)速為750rpm）后制備成CA-ME-RA。
　　 2、配制3組pH:1.2、6.8、

3、7.8的溶液。第1組分別在1、3個(gè)小時(shí);第2組分別在第1、3、5小時(shí);第3組分別在1、3、5、10小時(shí);用生物顯微鏡考察CA-ME-RA的形態(tài)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后分別將3組溶液離心，取下清液用pH計(jì)測(cè)其pH值，取各組的CA-ME-RA用標(biāo)尺測(cè)其粒徑，統(tǒng)計(jì)各組的粒徑均值。
　　 3、配置人工胃液、人工小腸液及人工結(jié)腸液。將CA-ME-RA分別置于上述三種人工胃腸液中，分別在1、3小時(shí);在1、3、5小時(shí);1、3、5、10小時(shí)，用生物顯微鏡考

4、察CA-ME-RA的形態(tài)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取下清液用pH計(jì)測(cè)其pH，取CA-ME-RA用標(biāo)尺測(cè)其平均粒徑。
　　 4、根據(jù)結(jié)腸氨的含量，分別配制2種不同濃度的氨水溶液（0.5mmol/L、1mmol/L）:分別在1、3小時(shí)測(cè)其氨清除率。
　　 5、取6只SD大鼠，禁食24小時(shí)后，晨起灌胃給藥（CA-ME-RA2ml/kg）一次，4小時(shí)后再次給藥（相同劑量）一次，5小時(shí)后再次給藥（相同劑量）一次，1小時(shí)后剖腹觀察胃腸道粘膜有無(wú)

5、損傷，并分別分離出多重乳液，測(cè)定其形態(tài)。
　　 6、取66只SD大鼠，隨機(jī)分為6組，其中1組為假手術(shù)組（Sham組），另5組制備肝性腦病的動(dòng)物模型，判定模型成功后，取3組分別予以低中高劑量(高劑量:5ml/kg/d、中劑量:2ml/kg/d、低劑量:1ml/kg/d)的CA-ME-RA灌胃治療4天后，觀察療效。同時(shí)取1組予以乳果糖(2ml/kg/d)灌胃治療，觀察療效，進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果:1、CA-ME-RA在不同p

6、H溶液下，對(duì)溶液pH均無(wú)明顯影響（P均＞0.05），且本身形態(tài)無(wú)明顯變化（P均＞0.05），平均粒徑均有增大(P＜0.05);人工胃腸液中分別測(cè)定其pH無(wú)明顯影響(P＞0.05)，ME-RA形態(tài)無(wú)明顯變化，平均粒徑均有增大(P＜0.05)。
　　 2、CA-ME-RA能夠快速有效的清除氨水溶液中的氨，1h后清除率達(dá)到了89％±1.7％。
　　 3、制備肝性腦病動(dòng)物模型，灌胃給藥治療后，行為學(xué)考察可見(jiàn)，高劑量組的動(dòng)物行為能

7、力較乳果糖治療組改善明顯(p＜0.01);血氨、腦組織氨及腸道氨的測(cè)定結(jié)果提示高劑量組與乳果糖治療組比明顯降低(p＜0.05);生化肝功指標(biāo)檢測(cè)及肝臟組織的病理結(jié)果提示高劑量組及中劑量組改善均較乳果糖治療組明顯(p＜0.05);腦組織含水量測(cè)定結(jié)果提示模型組較假手術(shù)組明顯升高(p＜0.01)，高劑量組及中劑量組較模型組明顯降低(p＜0.05)，乳果糖組較模型組無(wú)明顯改善;腦組織SOD及MDA檢測(cè)指標(biāo)提示高劑量組及乳果糖較模型組SOD升高

8、(p＜0.01)、MDA降低(p＜0.05)，腦組織病理提示模型組及各治療組均較假手術(shù)組有不同程度的病理改變。
　　 4、不同劑量的CA-ME-RA，均無(wú)降低血鈣(p＞0.05)，且對(duì)糞便含水量均較乳果糖影響小(p＜0.05)。
　　 5、CA-ME-RA能在在體胃腸道中保持形態(tài)不變，對(duì)胃腸道粘膜無(wú)明顯損傷。
　　 結(jié)論:1、CA-ME-RA在不同pH溶液及人工胃腸液中能保持一定穩(wěn)定性，且能有效的清除氨水中的氨。