胸膜肺炎放線桿菌ApxⅣ△orf1缺失株的構(gòu)建及生物學(xué)特性研究.pdf

1、分類號華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文胸膜肺炎放線桿菌Apxlv乙。rfj缺失株的構(gòu)建及生物學(xué)特性研究ConstructionandCharacterizationofaAPxIVAo成MutantofAetiRobaeiluSPleuroPneumoniae研究生:郭毅指導(dǎo)教師:陳煥春院士貝為成副教授專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向:病原分子生物學(xué)獲得學(xué)位名稱:農(nóng)學(xué)碩士獲得學(xué)位時間:2008年6月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技與動物醫(yī)學(xué)院二00八年六月2008

2、屆碩士研究生學(xué)位論文3.2.1胸膜肺炎放線桿菌的增殖.........................................................................……223.2.2胸膜肺炎放線桿菌基因組的提取.............................................................……233.2.3PCR產(chǎn)物和酶切產(chǎn)物的回收與純化............

3、.............................................……233.2.4大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備.....................................................................……233.2.5連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化.....................................................................

4、....................……233.2.6質(zhì)粒的制備..................................................................................................……233.2.7重組質(zhì)粒的鑒定........................................................................

5、.................……243.2.80爪基因上下游同源臂的克隆與鑒定......................................................……243.2.9重組自殺性質(zhì)粒pEMORF的構(gòu)建...........................................................……253.2.10胸膜肺炎放線桿菌基因缺失株的構(gòu)建..............

6、......................................……253.2.n缺失菌株生物學(xué)特性的研究....................................................................……263.2.H.1缺失株生長特性的研究.................……，.............................................……263.2

7、.11.2缺失株遺傳穩(wěn)定性的研究.................................................................……263.2.12缺失菌株對小鼠的毒力試驗及LD50的測定.......................................……263.2.13缺失株與親本株的致病性比較...............................................

8、.................……263.2.14缺失菌株對斷奶仔豬的免疫保護試驗....................................................……26第4章結(jié)果與分析....................................................................................................……284.1重組自殺性質(zhì)

9、粒PEMORF的構(gòu)建..................................................................……284.1.10汀基因上下游片段的擴增與測序............................................................……284.1.2重組自.殺性質(zhì)粒pEMORF的構(gòu)建..................................

10、.........................……284.2基因缺失株的篩選和鑒定...............................................................................……294.2.1基因缺失株SLW04的篩選和鑒定..........................................................……294.2.2基因缺失株S

11、LW05的篩選和鑒定..........................................................……314.3突變株生物學(xué)特性的研究...............................................................................……334.3.1突變株生長特性的研究....................................

12、..........................................……334.3.2突變株遺傳穩(wěn)定性的研究..........................................................................……344.4缺失菌株的毒力研究....................................................................

13、...................……354.4.1缺失菌株對小鼠LD50的測定.................................................................……354.4.2缺失株與親本株對仔豬致病性的比較.....................................................……354.5缺失株SLW05對斷奶仔豬的免疫保護試驗........

14、..........................................……364.5.1免疫仔豬血清抗體檢測結(jié)果......................................................................……364.5.2臨床癥狀.....................................................................……，..

15、.......................……364.5.3攻毒后仔豬的體溫變化..............................................................................……384.5.4肺損傷........................................................................................