菲律賓蛤仔凝集素的制備及其在魚(yú)類保鮮中應(yīng)用的研究.pdf

1、雙殼貝類同其它無(wú)脊椎動(dòng)物一樣，體內(nèi)缺乏脊椎動(dòng)物的抗原-抗體免疫系統(tǒng)，只能通過(guò)體液免疫來(lái)識(shí)別、抵抗及消除異物，而凝集素就是雙殼貝類免疫防御的主要參與者之一，因此具有多種生物活性。本研究以菲律賓蛤仔為材料，制備菲律賓蛤仔凝集素，研究其抑菌活性及在魚(yú)類保鮮中的應(yīng)用，為菲律賓蛤仔凝集素提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
　　本研究采用硫酸銨沉淀法獲得菲律賓蛤仔凝集素粗品，然后分別經(jīng)Cellulose DE52離子交換層析和 Sephadex G-100凝膠過(guò)

2、濾層析及 DEAE-Sepharose CL-6B離子交換層析和Sephacryl S-200 HR凝膠過(guò)濾層析兩步分離純化菲律賓蛤仔凝集素。確定出最佳制備工藝為：粗提液先用飽和度為80％的硫酸銨鹽析得到粗品，然后經(jīng)DEAE-Sepharose CL-6B離子交換層析和Sephacryl S-200 HR凝膠過(guò)濾層析兩步純化，得到菲律賓蛤仔凝集素MCL。研究了MCL的抑菌活性，結(jié)果表明菲律賓蛤仔凝集素對(duì)腐敗希瓦氏菌表現(xiàn)出良好的抑制活性，

3、且其抑菌活性具有溫度依賴性。用掃描電子顯微鏡觀察 MCL作用于腐敗希瓦氏菌后，細(xì)菌表面的形態(tài)變化，觀察到經(jīng) MCL處理后希瓦氏菌細(xì)胞表面變褶皺且出現(xiàn)孔洞，且30℃條件下孔洞數(shù)量多于4℃。測(cè)定了經(jīng)MCL處理后希瓦氏菌細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量的變化，與對(duì)照組相比，經(jīng)MCL處理的希瓦氏菌細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量較低，可能是由于MCL與希瓦氏菌細(xì)胞膜作用，擾亂膜脂分子排列，改變了細(xì)胞膜的通透性，影響細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能，在細(xì)胞膜上形成孔道致使細(xì)胞內(nèi)離子如Ca