CAPN5基因多態(tài)性與Behcet病及風(fēng)濕病相關(guān)葡萄膜炎的相關(guān)性分析.pdf

1、目的:
　　Behcet病又稱(chēng)皮膚-粘膜-眼綜合征，1973年由Hulusi Behcet首先報(bào)道，故而以他的名字命名。本病為一種影響全身多種器官的慢性遷徙性疾病，主要病理改變是閉塞性血管炎，臨床上以葡萄膜炎、口腔潰瘍、皮膚損害及陰部潰瘍?yōu)槠涮卣鳌４瞬≈饕l(fā)生于遠(yuǎn)東、中東和地中海沿岸的一些國(guó)家，我國(guó)也多見(jiàn)。目前原因不明，因本病患者常有多種自身抗體出現(xiàn)，因此可能是一種自身免疫疾病，或是由病毒感染誘發(fā)自身免疫反應(yīng)疾病。本病有明顯的遺傳

2、背景，眼部炎癥明顯的更有相關(guān)性。
　　風(fēng)濕病相關(guān)性葡萄膜炎，同屬于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，是我國(guó)葡萄膜炎最常見(jiàn)的類(lèi)型之一，其病因及發(fā)病機(jī)制尚不明，目前考慮與免疫有關(guān)。常見(jiàn)的有強(qiáng)直性脊柱炎、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、青年類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和Reiter綜合征等。20％～40％的強(qiáng)直性脊柱炎伴發(fā)葡萄膜炎，其眼部常變現(xiàn)為復(fù)發(fā)性非肉芽腫性前葡萄膜炎，嚴(yán)重者有纖維素滲出和前房積膿，常反復(fù)發(fā)作，可引起虹膜后粘連、繼發(fā)性青光眼、并發(fā)性白內(nèi)障等。目前有關(guān)該疾病的遺傳相關(guān)性尚

3、不清楚。
　　Calpain-5(CAPN5)基因系屬鈣蛋白酶基因超家族，是一類(lèi)半胱氨酸蛋白酶，需要鈣離子激活，廣泛表達(dá)于體內(nèi)各種組織，可調(diào)節(jié)多種細(xì)胞功能，包括細(xì)胞凋亡、細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)、增值和分化。Katherine J等發(fā)現(xiàn)CAPN5突變導(dǎo)致鈣蛋白酶催化活性增加與葡萄膜炎具有遺傳相關(guān)性。因此，CAPA5多態(tài)性有可能與Bechet病及風(fēng)濕病相關(guān)葡萄膜炎的易感性相關(guān)。
　　本次研究將首次探討CAPN5多態(tài)性可能與Bechet病

4、及風(fēng)濕病相關(guān)性葡萄膜炎的相關(guān)性，以及該基因多態(tài)性與不同類(lèi)型葡萄膜炎的相關(guān)性，以期尋找到與Bechet病及風(fēng)濕病相關(guān)性葡萄膜炎相關(guān)的基因多態(tài)。
　　方法:
　　1.研究對(duì)象
　　疾病組1:Behcet病組，36例（平均年齡31±14歲），包括32例男性，4例女性，均為2009-2014年就診于溫州醫(yī)科大學(xué)眼視光醫(yī)院葡萄膜炎組有的中國(guó)籍漢族患者，均符合國(guó)際葡萄膜炎研究組推薦的診斷標(biāo)準(zhǔn)。
　　疾病組2:風(fēng)濕病相關(guān)性葡萄

5、膜炎組，28例（平均年齡35±11歲），包括17例男性，11例女性，均為2012-2014年就診于溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院風(fēng)濕科的中國(guó)籍漢族患者，均符合國(guó)際葡萄膜炎研究組推薦的診斷標(biāo)準(zhǔn)。
　　正常對(duì)照組:為1000 Genomes Browser中CHS提供的數(shù)據(jù)，從中隨機(jī)抽取108人，包括56例男性，52例女性。
　　2.實(shí)驗(yàn)方法
　　取Behcet病及風(fēng)濕病相關(guān)性葡萄膜炎患者外周血2ml，對(duì)血樣進(jìn)行紅細(xì)胞裂解、蛋白

6、激酶K酶解、萃取及鹽析后提取DNA，溶解于1XTE，測(cè)溶度后保存于-20攝氏度。
　　基因測(cè)序分析:通過(guò)IDT(INTEGRATED DNA TECHNOLOGIES)設(shè)計(jì)CAPN5外顯子引物，均采取聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)進(jìn)行外顯子擴(kuò)增，送至相關(guān)測(cè)序公司進(jìn)行測(cè)序，數(shù)據(jù)返回后進(jìn)行相關(guān)分析。
　　3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　本研究統(tǒng)計(jì)分析采用Windows SPSS verion12.0統(tǒng)計(jì)軟件。Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)用卡方