阿托伐他汀抗氧化作用對(duì)血管損傷小鼠血管重構(gòu)的影響.pdf

1、目的:觀察不同劑量阿托伐他汀對(duì)血管損傷小鼠血管內(nèi)膜、中膜、NADPH氧化酶、血管壁超氧陰離子的影響。
　　 方法:雄性C57BL/6小鼠股動(dòng)脈外疏松地套上聚乙烯套管,制作成血管損傷模型。隨機(jī)分為5組:正常對(duì)照組、手術(shù)對(duì)照組、假手術(shù)對(duì)照組、阿托伐他汀治療組:低劑量組(2.5mg/kg.d)、高劑量組(5mg/kg.d),通過灌胃給藥,分別于第7天、第14天處死小鼠。取治療組、手術(shù)對(duì)照組損傷處股動(dòng)脈,取正常對(duì)照組、假手術(shù)對(duì)照組股動(dòng)脈

2、,分別采用HE染色及NIH圖像分析軟件測(cè)量血管內(nèi)膜及中膜面積,RT-PCR法檢測(cè)p22phox、p47phox及rac-1mRNA表達(dá)水平,應(yīng)用光澤精化學(xué)發(fā)光法測(cè)定股動(dòng)脈O2-的含量。各組隨機(jī)抽取16只老鼠測(cè)實(shí)驗(yàn)前后血脂及肝功能。正常對(duì)照組與假手術(shù)對(duì)照組僅用于證明造模成功及排除手術(shù)干擾。
　　 結(jié)果:①7天時(shí)間段內(nèi),假手術(shù)對(duì)照組、正常對(duì)照組,無內(nèi)膜增厚(內(nèi)膜面積:0μm2);手術(shù)對(duì)照組內(nèi)膜面積與各組比較有顯著差異(p＜0.05)

3、,內(nèi)膜增厚程度最大(269.95±2.4lμm2);低劑量治療組(160.17±2.44μm2)與高劑量治療組(160.17±2.39μm2)較手術(shù)對(duì)照組內(nèi)膜增厚程度顯著減輕(p＜0.05),兩治療組間比較無顯著差異(p＞0.05);各組中膜均無增厚表現(xiàn)(p＞0.05)。14天時(shí)間段內(nèi),假手術(shù)對(duì)照組、正常對(duì)照組,無內(nèi)膜增厚(內(nèi)膜面積:0μm2);手術(shù)對(duì)照組內(nèi)膜面積與各組比較有顯著差異(p＜0.05),內(nèi)膜增厚程度最大(370.21±2.

4、42μm2):低劑量治療組(199.86±2.48μm2)與高劑量治療組(201.51±3.11μm2)較手術(shù)對(duì)照組內(nèi)膜增厚程度顯著減輕(p＜0.05),兩治療組間比較無顯著差異(p＞0.05);各組中膜均無增厚表現(xiàn)(p＞0.05)。14天手術(shù)對(duì)照組(370.21±2.42μm2)較7天手術(shù)對(duì)照組(269.95±2.41μm2)內(nèi)膜增厚程度高(p＜0.05),以各時(shí)間段手術(shù)對(duì)照組為參照,14天治療組較7天治療組內(nèi)膜增厚速度,明顯減緩。②

5、p22phox、p47phox及rac-1mRNA的相對(duì)表達(dá)量,7天時(shí)間段內(nèi),正常對(duì)照組(0.1450±0.037、0.1350±0.034、0.1363±0.030)與假手術(shù)對(duì)照組(0.1325±0.033、0.1338±0.032、0.1350±0.033)表達(dá)量最低,低劑量治療組(0.5300±0.038、0.5238±0.037、0.5450±0.037)與高劑量治療組(0.5225±0.028、0.5163±0.030、0.5

6、350±0.040)表達(dá)量較高,手術(shù)對(duì)照組(0.7475±0.036、0.7438±0.032、0.7400±0.020)表達(dá)量最高,兩治療組間表達(dá)量無顯著差異(p＞0.05);14天時(shí)間段內(nèi),正常對(duì)照組(0.1313±0.031、0.1200±0.025、0.1388±0.036)與假手術(shù)對(duì)照組(0.1350±0.024、0.1350±0.024、0.1425±0.031)表達(dá)量最低,低劑量治療組(0.3450±0.032、0.341

7、3±0.029、0.3350±0.033)與高劑量治療組(0.3500±0.035、0.3363±0.032、0.3325±0.029)較高,手術(shù)對(duì)照組(0.8875±0.030、0.8788±0.020、0.9138±0.015)最高,兩治療組間表達(dá)量無顯著差異(p＞0.05);14天手術(shù)對(duì)照組(0.8875±0.030、0.8788±0.020、0.9138±0.015)較7天手術(shù)對(duì)照組(0.7475±0.036、0.7438±0.

8、032、0.7400±0.020)表達(dá)量明顯增高,14天治療組較7天治療組表達(dá)量明顯減低。④股動(dòng)脈血管壁上O2-的含量,7天時(shí)間段內(nèi),正常對(duì)照組(1726.09±110.96nmol/(mg·min))與假手術(shù)對(duì)照組(1820.10±118.50nmol/(mg·min))含量最低,低劑量治療組(3680.07±302.18nmol/(mg·min))與高劑量治療組(3492.74±248.02nmol/(mg·min))含量較高,手術(shù)

9、對(duì)照組(5743.57±120.12nmol/(mg·min))含量最高,兩治療組間含量無顯著差異(p＞0.05);14天時(shí)間段內(nèi),正常對(duì)照組(1582.37±248.55nmol/(mg·min))與假手術(shù)組(1557.50±188.72nmol/(mg·min))含量最低,低劑量治療組(2454.09±224.82nmol/(mg·min))與高劑量治療組(2378.05±262.89nmol/(mg·min))較高,手術(shù)對(duì)照組(7

10、695.14+247.83nmol/(mg·min))最高,兩治療組間含量無顯著差異(p＞0.05);14天手術(shù)對(duì)照組(7695.14±247.83nmol/(mg·min))較7天手術(shù)對(duì)照組(5743.57+120.12nmol/(mg·min))含量明顯增高,14天治療組較7天治療組含量明顯降低。④通過Spearman秩相關(guān)分析,可以發(fā)現(xiàn)p47phoxmRNA、p22phoxmRNA,raclmRNA相對(duì)表達(dá)量與O2-含量之間是呈正

11、相關(guān)關(guān)系,相關(guān)系數(shù)r1=0.918,r2=0.907,r3=0.920,P(0.05,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論:短期應(yīng)用阿托伐他汀能通過抑制NADPH氧化酶系統(tǒng)主要亞單位p22phox、p47phox,rac-1mRNA的表達(dá),進(jìn)而降低超氧陰離子的產(chǎn)生,發(fā)揮抗氧化作用,而減緩損傷血管內(nèi)膜增厚的速度,達(dá)到抑制損傷血管重構(gòu)的目的。該作用僅是眾多抗氧化作用機(jī)理中的一部分,且這種作用獨(dú)立于其降脂效應(yīng),短期內(nèi)呈時(shí)間依賴性,但是加大劑量