慢性乙型肝炎相關肝纖維化的實驗診斷方法的研究與評價.pdf

1、目的：評價無創(chuàng)性血清學指標對慢性乙型肝炎（CHB）相關肝纖維化的診斷價值，初步構建logistic回歸方程和人工神經(jīng)網(wǎng)絡（ANN）預測模型用于CHB相關肝纖維化的分期診斷。
　　 方法：108例CHB患者，按病理診斷炎癥分級G1級16例、G2級21例、G3級51例、G4級20例；按纖維化分期S0期12例、S1期18例、S2期21例、S3期20例、S4期37例。53例對照組包括非CHB其他疾病患者23例，健康體檢30例。收集患者和

2、對照組血清，利用化學發(fā)光法檢測四項纖維化直接指標即透明質酸（HA）、層粘蛋白（LN）、Ⅲ型前膠原氨基端肽（PⅢNP）、Ⅳ型膠原（CⅣ）；利用顆粒增強免疫散射比濁法、速率法、氧化法和比濁法分別檢測五項纖維化間接指標α2-巨球蛋白（α2M）、觸珠蛋白（HPT）、谷氨酰轉移酶(GGT)、總膽紅素（TBIL）、載脂蛋白A1(ApoA1）,并通過公式計算出綜合指標Fibrotest指數(shù)；直接指標和綜合指標分別與肝活檢組織病理結果相比較，通過繪制受

3、試者工作特征（ROC）曲線，評價其對CHB相關肝纖維化的診斷價值，并探討聯(lián)合診斷價值。分別以肝纖維化和肝硬化為因變量，以性別、年齡、四項直接指標、Fibrotest指數(shù)以及白蛋白（ALB）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉移酶（AST）、膽堿酯酶（ChE）、5，-核苷酸酶（5，-NT）、腺苷脫氨酶（ADA）、血小板（PLT）、凝血酶原時間（PT）、纖維蛋白原（FIB）為自變量作單/多因素非條件Logistic分析，篩選與纖維化

4、和肝硬化獨立相關的指標，分別建立Logistic回歸方程；同時應用Matlab6.5軟件初步構建ANN預測模型用于CHB相關肝纖維化的分期診斷。
　　 結果：CHB組血清HA（63.95 ng/ml）、LN（78.39 ng/ml）、PⅢNP（9.26 ng/ml）、CⅣ（67.32 ng/ml）和Fibrotest指數(shù)（0.41±1.55）水平均明顯高于正常對照組（HA 19.73 ng/ml、LN 26.84 ng/ml、P

5、ⅢNP 2.58 ng/ml、CⅣ 15.30ng/ml，F(xiàn)ibrotest指數(shù)-1.03±0.63），差異有統(tǒng)計學意義（P均＜0.01）；CHB組LN、PⅢNP、CⅣ和Fibrotest指數(shù)水平高于疾病對照組（LN 30.69 ng/ml、PⅢNP 6.10ng/ml、CⅣ35.27 ng/ml，F(xiàn)ibrotest指數(shù)-0.59±1.58），差異有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05），而HA差異無統(tǒng)計學意義（疾病對照組68.23 ng/ml，

6、 P﹥0.05）；無炎癥組的HA（34.72 ng/ml）、LN（30.67 ng/ml）、PⅢNP（3.90ng/ml）、CⅣ（23.31ng/ml）和Fibrotest指數(shù)（-0.84±1.15）低于G3組（HA76.63 ng/ml、LN120.38 ng/ml、PⅢNP10.01ng/ml、CⅣ74.25 ng/ml，F(xiàn)ibrotest指數(shù)0.34±1.20），更低于G4組（HA 104.68 ng/ml、LN 174.20ng

7、/ml、PⅢNP 15.95 ng/ml、CⅣ144.35 ng/ml，F(xiàn)ibrotest指數(shù)1.74±1.53，P均＜0.001）；G4組的五項指標顯著高于G1組（HA 40.55 ng/ml、LN 32.03 ng/ml、PⅢNP 5.95 ng/ml、CⅣ 40.66 ng/ml，F(xiàn)ibrotest指數(shù)-0.24±1.39）和G2組（HA 35.77 ng/ml、LN 22.72 ng/ml、PⅢNP 6.13 ng/ml、CⅣ

8、35.49 ng/ml，F(xiàn)ibrotest指數(shù)0.23±1.28），差異有統(tǒng)計學意義（P﹤0.01）；無纖維化組的HA（34.72 ng/ml）、LN（30.67 ng/ml）、PⅢNP（3.90ng/ml）、CⅣ（23.31ng/ml）和Fibrotest指數(shù)（-0.84±1.15）低于S3組（HA 66.31ng/ml、LN 130.27 ng/ml、PⅢNP 8.73 ng/ml、CⅣ86.86 ng/ml，F(xiàn)ibrotest指數(shù)

9、0.62±1.29），更低于S4組（HA 88.78 ng/ml、LN 154.84 ng/ml、PⅢNP 12.36 ng/ml、CⅣ 112.74 ng/ml，F(xiàn)ibrotest指數(shù)1.15±1.63），差異有統(tǒng)計學意義（P﹤0.01）；S4組的Fibrotest算術均數(shù)顯著高于S1組（-0.24±1.84）和S2組（-0.27±1.26），差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；CHB炎癥分級和纖維化分期級別越高，各指標的濃度也越高；各

10、指標診斷炎癥的受試者工作特征曲線下面積（AUC）依次為PⅢNP（0.793）﹥CⅣ(0.787）﹥Fibrotest(0.753)﹥LN(0.715）﹥HA（0.631），其中LN可以陽性似然比﹥10診斷炎癥，五項指標聯(lián)合以陰性似然比﹤0.1排除炎癥；各指標診斷纖維化的AUC依次為Fibrotest(0.80)﹥CⅣ（0.771）﹥PⅢNP (0.755）﹥LN(0.738）﹥HA（0.626），其中LN可以陽性似然比﹥10診斷肝纖維化

11、，五項指標聯(lián)合以陰性似然比﹤0.1排除肝纖維化；各指標診斷肝硬化的AUC依次為Fibrotest(0.776)﹥CⅣ（0.752）﹥LN(0.745）﹥PⅢNP (0.725）﹥HA（0.625），五項指標聯(lián)合可以陰性預測值98.1％排除肝硬化。由Logistic分析結果可得到診斷CHB肝纖維化的回歸方程：logitP=-2.739+3.270*性別+0.003*CⅣ+1.959*α2M-0.032*PLT；診斷CHB早期肝硬化的回歸方

12、程：LogitP=16.388+2.85*性別+0.004*CⅣ-0.037*PLT-1.694*FIB；23例ANN模型驗證組中預測結果與病理學診斷結果一致的有17例；對有無纖維化的診斷，ANN模型預測的靈敏度為95.0％，特異度為66.67％，準確率達91.30％。
　　 結論：纖維化血清學指標對監(jiān)測CHB相關肝纖維化的進程有一定診斷價值，聯(lián)合直接指標和綜合指標可提高診斷效率，減少不必要的肝活檢；化學發(fā)光法檢測直接指標對CH