黃曲霉毒素適配體傳感器檢測(cè)方法建立及其穩(wěn)定性研究.pdf

1、黃曲霉毒素B1(AFB1)是毒性最強(qiáng)的霉菌毒素之一，引起了全球在飼料和食品安全領(lǐng)域的關(guān)注。為了阻止污染的飼料和食品帶來的食品安全恐慌和經(jīng)濟(jì)損失，開發(fā)AFB1快速，靈敏和特異性的檢測(cè)方法顯得極其重要。本文開發(fā)了一種簡(jiǎn)單，超靈敏和可靠的適配體傳感器檢測(cè)AFB1。該方法利用AFB1的適配體作為分子識(shí)別探針，與適配體互補(bǔ)的DNA作為實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-qPCR)的模板產(chǎn)生信號(hào)。優(yōu)化條件下，該方法的檢測(cè)范圍為5.0×10-5～5.0 n

2、g·mL-1，極高的靈敏度為25fg·mL-1。本研究選擇其他的八種霉菌毒素作為干擾物檢測(cè)后Ct值沒有明顯的改變，表明適配體傳感器對(duì)AFB1極好的特異性。同時(shí)該傳感器也可以應(yīng)用于實(shí)際樣品羊草和嬰幼兒米粉中AFB1的檢測(cè)，獲得滿意的回收率分別為88％～127％和94％～119％。該方法在定量和高通量檢測(cè)飼料和食品中的霉菌毒素方面有很大的潛在應(yīng)用，并且檢測(cè)的目標(biāo)物還可以擴(kuò)大到更大的范圍。
　　AFB1可以直接污染食品，或者間接污染飼料

3、，動(dòng)物采食AFB1后，在奶中產(chǎn)生代謝物黃曲霉毒素M1(AFM1)[1,2]。AFM1被IARC歸類為次級(jí)組致癌物質(zhì)，其毒性比AFB1弱[3]。本研究旨在通過檢測(cè)生鮮乳不同儲(chǔ)存條件下黃曲霉毒素M1(AFM1)的殘留水平分析AFM1的儲(chǔ)存穩(wěn)定性，儲(chǔ)存條件包括儲(chǔ)存溫度，儲(chǔ)存時(shí)間，復(fù)溫溫度、解凍次數(shù)和添加防腐劑等。研究結(jié)果表明，在不同的儲(chǔ)存條件下，包括4℃冷藏保存，-20℃冷凍保存，-20℃冷凍保存24h后復(fù)溫溫度，反復(fù)凍融后解凍次數(shù)以及添加不