植物藥中檢測黃曲霉毒素IAC-HPLC方法的研究.pdf

1、黃曲霉毒素(Aflatoxins，簡稱AFT)是目前已知作用最強的基因毒性物質(zhì)和致癌物質(zhì)，在高溫、高濕環(huán)境下，極易產(chǎn)生且不易去除。我國藥材種植、加工、運輸、存儲過程中，稍有不慎，極易染毒。本研究建立了適合于普遍植物藥材進行黃曲霉毒素檢測的IAC-HPLC法，并運用該法對福州各大藥店的11種藥材（甘草、當歸、澤瀉、山藥、絞股藍、魚腥草、麥冬、枸杞子、三七花、紅花、山楂）進行黃曲霉毒素污染調(diào)查，為完善的限量標準及檢測方法提供科學(xué)參考。研究內(nèi)

2、容如下：
　　1.對中藥材中黃曲霉毒素檢測步驟的前處理、凈化、衍生方式、色譜條件進行探索、優(yōu)化，成功建立植物藥材中檢測黃曲霉毒素的高效液相法。該法以信噪比S/N=3∶1（N=噪聲，S=被測物信號/單位體積）作為最低檢出限。黃曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1和AFG2的最低檢測限分別為0.1、0.02、0.05和0.05μg/kg。以目前最嚴格的歐盟限量標準AFB1＜2μg/kg，此方法能滿足現(xiàn)在國際上越來越嚴格的黃曲霉毒素限量

3、的檢測要求。以甘草為基質(zhì)，加標水平在0.5～8ng/mL范圍內(nèi)，線性方程為：YB1=37959X+669.33（r=0.9999）；YB2=81720X+2225.8（r=0.9999）；YG1=35430X+1821.6（r=0.9999）；YG2=18884X+654.04（r=0.9999）；除AFG2外加標回收率在62%～88%，其余加標回收率在74%～108%，日內(nèi)和日間RSD為1.02～11.7％，1.53%～6.21%，結(jié)

4、果證明該方法準確、可靠，適用于中藥材中黃曲霉毒素的檢測。
　　2.在黃曲霉毒素檢測步驟中，凈化是重要一環(huán)，本實驗對凈化用免疫親和柱進行效能比較及最佳使用條件進行研究。本實驗選用Vicam、Clover、Romer、華安麥科公司的這四種目前最常使用的黃曲霉毒素總量柱進行研究，結(jié)果表明：Vicam、Clover、Romer、華安麥科的黃曲霉毒素總量柱，最大承受AFB1的柱容量分別為：355ng、287ng、602ng、475ng。Ro

5、mer的加標回收率好于其他，平均達107%。免疫親和柱的上樣的甲醇和乙腈耐受度分別在20%和10%以下;Cover和華安麥科公司產(chǎn)的IAC柱pH值在7.0是為吸附最優(yōu)，Vicam和Romer公司產(chǎn)IAC柱pH值分別在7.2和7.4為吸附最優(yōu)。各種品牌免疫親和柱的重復(fù)利用中，活化時間均要求大于18小時。各品牌IAC柱均可重復(fù)使用1～3次且吸附率均在90%以上，3次重復(fù)使用后回收率不同程度減低，其中在吸附率可使用范圍內(nèi)，華安麥科公司的IAC