小分子黃酮包合物的制備及活性研究.pdf

1、本論文探討了用飽和水溶液電動(dòng)攪拌法制備異甘草素(isoliquiritigenin)和4’，7-二羥基異黃酮(daidzein)β-環(huán)糊精包合物的最佳工藝，利用熒光光譜法從分子水平研究異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮兩個(gè)黃酮類小分子化合物與人血清白蛋白的相互作用，采用平板打孔法和二倍稀釋法測(cè)定異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮及其β-環(huán)糊精包合物對(duì)藤黃微球菌(micrococcus luteus)的體外抑菌活性。論文分為以下五個(gè)部分：

2、r>　　 1.綜述了β-環(huán)糊精和HSA的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)，介紹了β-環(huán)糊精包合物的制備方法和研究進(jìn)展以及小分子與蛋白相互作用的主要方法和研究進(jìn)展，為本論文的展開鋪墊了理論依據(jù)。
　　 2.篩選制備異甘草素-β-CD包合物的最佳方法和最佳制備條件，以收率和包合率為指標(biāo)，通過超聲法、微波法和飽和水溶液電動(dòng)攪拌法比較，得到制備異甘草素-β-CD包合物的最佳包合方法是飽和水溶液電動(dòng)攪拌法。利用計(jì)算機(jī)模擬得到異甘草素和β-CD可能的包合方式為

3、：異甘草素的A環(huán)進(jìn)入β-CD的大口端，B環(huán)進(jìn)入β-CD的小口端。然后采用正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化工藝條件，最佳包合條件為：異甘草素和β-CD的配比(摩爾比)1:2，包合時(shí)間5h、溫度60℃。包合率>98%，并通過IR和X-RD對(duì)包合物進(jìn)行了驗(yàn)證。
　　 3.利用飽和水溶液電動(dòng)攪拌法制備了4’，7-二羥基異黃酮-β-CD包合物，并通過IR和X-RD對(duì)其進(jìn)行鑒定。熒光光度法確定了4’，7-二羥基異黃酮和β-CD的摩爾配比為1:2。
　

4、　 4.利用熒光光譜法研究了異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮與HSA的相互作用。研究結(jié)果表明，異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮對(duì)HSA的內(nèi)源熒光都有猝滅作用，猝滅類型都屬于靜態(tài)猝滅。由結(jié)合位點(diǎn)數(shù)表明異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮在HSA上有1個(gè)結(jié)合位點(diǎn)。根據(jù)不同溫度下的熱力學(xué)參數(shù)，推導(dǎo)出異甘草素與HSA相互作用力主要是疏水相互作用，而4’，7-二羥基異黃酮與HSA相互作用力主要是靜電引力。采用同步熒光光譜和三維熒光光譜研究了異甘草素

5、和4’，7-二羥基異黃酮對(duì)HSA構(gòu)象的影響，表明異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮的加入使HSA疏水腔微環(huán)境極性發(fā)生了改變，進(jìn)而導(dǎo)致了HSA構(gòu)象的變化。
　　 5.采用高效液相色譜法，以異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮相對(duì)含量為考察指標(biāo)，考察了其環(huán)糊精包合物在溫度、濕度、光度影響下的穩(wěn)定性。采用平板打孔法二倍稀釋法測(cè)定了異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮及其包合物對(duì)藤黃微球菌的體外抑菌活性。研究結(jié)果表明：異甘草素和4’，7-二羥基異