基于量子點的熒光免疫分析在幾種農(nóng)獸藥殘留檢測中的應(yīng)用研究.pdf

1、量子點(QDs)是近年發(fā)展起來的一種新型熒光納米材料，與傳統(tǒng)有機熒光染料相比，具有許多優(yōu)良的熒光性能，在生物分析化學、熒光免疫學、基因組學、蛋白質(zhì)組學和細胞生物學等領(lǐng)域顯示出廣闊的應(yīng)用前景，已經(jīng)引起人們的廣泛關(guān)注。
　　 本論文在簡要綜述量子點技術(shù)發(fā)展的基礎(chǔ)上，以量子點制備、純化、性能表征及在農(nóng)藥和獸藥殘留檢測中應(yīng)用為主線，主要開展以下幾個方面工作。
　　 一、基于量子點和羊抗小鼠二抗的偶聯(lián)物，建立一種靈敏、快速檢測飲用

2、水中毒死蜱的熒光免疫分析法(cFLISA)。
　　 基于量子點和二抗偶聯(lián)物的熒光免疫分析法(cFLISA)中的線性檢測范圍為15.2-205.5ngmL-1，靈敏度(IC50)為50.2ngmL-1，檢出限(LOD)為8.2ngmL-1。
　　 熒光免疫分析法(cFLISA)與傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)相比，不僅靈敏度提高1.5倍，檢測時間也縮短0.5h。
　　 在實際水樣檢測中，熒光免疫分析法(cFLIS

3、A)的檢測結(jié)果與酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)、高效液相色譜方法(HPLC)的檢測結(jié)果相符，表明該方法可用于環(huán)境和食品中農(nóng)藥殘留的檢測和大規(guī)模樣品篩查。
　　 二、利用水相法合成碲化鎘量子點，并制備相應(yīng)量子點-鏈霉親和素熒光探針(QDs-SA)，建立基于QDs-SA偶聯(lián)物的新型熒光免疫分析方法(QDs-SA-cFLISA)并應(yīng)用于毒死蜱的檢測。
　　 采用水相合成法，以巰基丙酸為穩(wěn)定劑，制備表面帶羧基的水溶性碲化鎘量子點(

4、CdTeQDs)；其激發(fā)光譜寬且連續(xù)，發(fā)射光譜比較窄而對稱，粒徑比較均一，熒光性質(zhì)穩(wěn)定，具有良好的光學性能。
　　 將表面帶羧基的水溶性碲化鎘量子點(CdTeQDs)和鏈霉親和素(SA)偶聯(lián)，制備量子點-鏈霉親和素熒光探針(QDs-SA)，作為信號系統(tǒng)和信號放大系統(tǒng)，建立新型的熒光免疫分析方法(QDs-SA-cFLISA)。
　　 熒光免疫分析方法(QDs-SA-cFLISA)與常規(guī)酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)相比，量子

5、點-鏈霉親和素熒光探針(QDs-SA)取代常規(guī)酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)中的酶標抗體，靈敏度提高5.5倍，檢測時間縮短1h。
　　 在實際水樣檢測中，熒光免疫分析方法(QDs-SA-cFLISA)的檢測結(jié)果與酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)、高效液相色譜方法(HPLC)的檢測結(jié)果相符，表明該方法可用于飲用水中毒死蜱殘留的檢測。
　　 三、小分子直接包被技術(shù)和量子點(QDs)納米材料相結(jié)合，建立靈敏、快速的免疫分析方法并用于

6、蝦仁中氯霉素的檢測。
　　 酶標板表面用戊二醛(GA)處理，引入醛基與氨基化氯霉素直接偶聯(lián)，將氯霉素小分子直接包被在酶標板上，并結(jié)合生物素化一抗和量子點-鏈霉親和素熒光探針(QDs-SA)，建立基于小分子半抗原直接包被方式和量子點(QDs)熒光探針結(jié)合的新型熒光免疫分析方法(QDs-SA-directHapcoatedcFLISA)。
　　 熒光免疫分析方法(QDs-SA-directHapcoatedcFLISA)的直

7、接包被模式與傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)的完全抗原包被模式相比，抗原-抗體結(jié)合效率高且穩(wěn)定性強，不僅靈敏度提高5倍，檢測時間也縮短1h。
　　 在實際樣品蝦仁檢測中，熒光免疫分析方法（QDs-SA-directHapcoatedcFLISA）的檢測結(jié)果與酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)、高效液相色譜方法(HPLC)的檢測結(jié)果相吻合，表明該方法可作為傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)重要的補充，也用于食品和環(huán)境中獸藥殘留的檢測。