腐敗希瓦氏菌代謝氧化三甲胺相關(guān)研究.pdf

1、對(duì)來(lái)源于鱈魚(yú)魚(yú)肉混合菌群進(jìn)行分離純化，檢測(cè)了菌群代謝TMAO的能力進(jìn)行，分析了在TMAO代謝過(guò)程中細(xì)菌參與其中可能的途徑。對(duì)其中能夠代謝TMAO的細(xì)菌YY進(jìn)行了16SrDNA的分析鑒定，對(duì)于經(jīng)過(guò)反復(fù)培養(yǎng)能夠穩(wěn)定代謝TMAO的菌株YY再經(jīng)過(guò)Biolog微孔鑒定，以及菌體脂肪酸成分的鑒定與分析，最終確定這株菌是(Shewanella putrefaciens腐敗希瓦氏)，在目前國(guó)內(nèi)外能夠代謝TMAO的細(xì)菌的文獻(xiàn)中有過(guò)報(bào)道。TMAO可能是YY

2、菌株呼吸產(chǎn)能過(guò)程中的電子傳遞的最終受體，并被其還原為TMA，而且對(duì)TMAO的還原產(chǎn)物TMA不能繼續(xù)代謝產(chǎn)生甲醛或者其他含氮物質(zhì)。
　　 本文通過(guò)分析24h內(nèi)菌株YY在有氧和厭氧條件下對(duì)TMAO的利用情況和細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，確定TMAO還原所發(fā)生的階段是在的YY生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期，這與目前報(bào)道是一致的。通過(guò)對(duì)YY在有氧和厭氧條件下進(jìn)行培養(yǎng)，同時(shí)對(duì)發(fā)酵液中TMAO及其代謝產(chǎn)物進(jìn)行的的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)在生長(zhǎng)過(guò)程中，YY對(duì)TMAO的還原沒(méi)有受氧氣的抑制

3、，而在有氧條件下比厭氧條件下對(duì)TMAO還原程度更大，這說(shuō)明在這YY細(xì)菌中所存在的TMAO還原酶在氧氣存在時(shí)具有更高的活性，與此前報(bào)道的大腸桿菌等細(xì)菌中的TMAO還原酶可能不同，并且可能存在著其他電子轉(zhuǎn)移方式，與大腸桿菌以細(xì)胞色素為中間介質(zhì)的電子傳遞過(guò)程有所差異此外，通過(guò)在新鮮鱈魚(yú)肉中分別加入適當(dāng)濃度的YY菌懸液，置于4℃冷藏溫度和室溫25℃下恒溫恒濕培養(yǎng)，并用加入對(duì)應(yīng)體積的無(wú)菌生理鹽水的新鮮鱈魚(yú)肉作空白對(duì)照，通過(guò)感官觀察發(fā)現(xiàn)，在室溫條件

4、下加入菌懸液的鱈魚(yú)肉細(xì)菌大量繁殖，并且迅速導(dǎo)致魚(yú)肉的腐敗。將魚(yú)肉中TMAO及其代謝產(chǎn)物的檢測(cè)結(jié)果與空白對(duì)照進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)魚(yú)肉在細(xì)菌侵染的情況下，其中的TMAO迅速被還原為TMA，而且魚(yú)肉中的TMAOase也被快速的激活，在4h時(shí)就有TMA的產(chǎn)生，并隨著腐敗過(guò)程而逐漸積累。這說(shuō)明鱈魚(yú)肉能為YY提供非常好的生長(zhǎng)環(huán)境，YY菌懸液加入后，細(xì)菌快速生長(zhǎng)繁殖導(dǎo)致魚(yú)肉組織的迅速軟化和水解，加速了魚(yú)肉的腐敗，而這一過(guò)程又促進(jìn)了組織中的TMAOase釋放

5、與激活，使魚(yú)肉組織中的DMA和FA含量迅速增加。
　　 溫度為15℃～35℃之間TMAO的代謝率基本上隨著溫度升高而略有升高，8h后逐漸趨同。菌株YY為廣耐鹽細(xì)菌，最適鹽度為15g/L～35g/L，隨著鹽度的升高，YY菌株的生長(zhǎng)能力與代謝TMAO的能力受到限制。鹽度對(duì)菌株YY代謝TMAO的影響比對(duì)菌株自身生長(zhǎng)的影響要更為明顯，作用也較為突出。
　　 pH通過(guò)影響微生物體內(nèi)代謝過(guò)程中酶的活性，從而影響微生物TMAO的代謝速