一種抗菌多肽的畢赤酵母表達(dá)的初步研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩59頁未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、上海高科聯(lián)合生物技術(shù)有限公司設(shè)計(jì)合成的抗菌肽GK8具有良好的殺菌活性，前期已人工合成了一定量的純品，同時對GK系列抗菌肽也進(jìn)行了大腸桿菌的融合表達(dá)。這為本文開展GK8畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)的研究創(chuàng)造了條件。選用的巴氏畢赤酵母不但具有原核生物易培養(yǎng)、操作便利等特點(diǎn)，又具有真核生物蛋白翻譯后加工的能力；同時具有高表達(dá)、高穩(wěn)定和高分泌等優(yōu)點(diǎn)。其表達(dá)質(zhì)粒屬于分泌型，便于提取和純化。
　　 本研究在由上海生工生物工程有限公司訂購的質(zhì)粒pUC57

2、-GK8和設(shè)計(jì)的引物P1、P2的基礎(chǔ)上，以pUC57－GK8質(zhì)粒DNA為模板，通過PCR擴(kuò)增鑒定該質(zhì)粒的可靠性。將含有pUC57-GK8質(zhì)粒大腸桿菌DH5α進(jìn)行大量表達(dá)。經(jīng)質(zhì)粒提取、酶切鑒定篩選出陽性克隆用于構(gòu)建重組質(zhì)粒pPIC9K-GK8。重組質(zhì)粒pPIC9K－GK8電轉(zhuǎn)化到畢赤酵母中，通過G418篩選和雙酶切鑒定選擇轉(zhuǎn)化了pPIC9K－GK8的畢赤酵母菌株進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)，收集畢赤酵母分泌表達(dá)的目標(biāo)產(chǎn)物GK8。通過SDS-PAGE電泳和

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論