富硒產(chǎn)朊假絲酵母的制備及性能研究.pdf

1、硒(Se)是維持人體正常生命活動(dòng)所必需的元素之一。缺硒可導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生，通過(guò)膳食攝取足夠的硒將可以對(duì)疾病起到很好的預(yù)防作用。硒的補(bǔ)充可以通過(guò)攝入無(wú)機(jī)硒或有機(jī)硒而得以實(shí)現(xiàn)，但無(wú)機(jī)硒的毒性較大限制了它的廣泛應(yīng)用。富硒酵母富含蛋白質(zhì)和B族維生素，安全性強(qiáng)、生物利用率高，同時(shí)有很好的自由基清除功能，能夠提高機(jī)體的免疫性能、延緩衰老等優(yōu)點(diǎn)而成為首選的補(bǔ)硒產(chǎn)品。
　　 富硒酵母的制備通常是在酵母培養(yǎng)過(guò)程中將一定濃度的無(wú)機(jī)硒源物質(zhì)添加到培

2、養(yǎng)基中，伴隨著酵母細(xì)胞的生長(zhǎng)代謝而得到富硒產(chǎn)品。產(chǎn)朊假絲酵母（Candidautilis）可用于富硒酵母的制備，其在富集硒的同時(shí)還可以在胞內(nèi)積累谷胱甘肽(GSH)，因而受到了廣泛的關(guān)注。高性能（高有機(jī)硒含量和高谷胱甘肽含量）富硒產(chǎn)朊假絲酵母由于其在補(bǔ)硒的同時(shí)還可以提高機(jī)體免疫力，因而將具有更廣闊的市場(chǎng)前景和應(yīng)用價(jià)值。
　　 GSH是細(xì)胞內(nèi)重要的抗氧化分子，在細(xì)胞抵抗自由基和毒性物質(zhì)引起的損傷中起著重要的作用。近年來(lái)，隨著研究的不

3、斷深入，GSH在臨床醫(yī)藥、食品加工、化妝品以及畜牧生產(chǎn)中都將具有良好的應(yīng)用前景。
　　 本論文以GSH積累株C.utilis SZU07-01為出發(fā)菌株，以高性能（高有機(jī)硒含量和高GSH含量）富硒產(chǎn)朊假絲酵母的制備及性能為目標(biāo)展開(kāi)研究，具體研究?jī)?nèi)容如下:
　　 (1)在搖瓶和發(fā)酵罐水平上分別研究了亞硒酸鈉濃度及其添加方式對(duì)高性能富硒產(chǎn)朊假絲酵母制備的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，亞硒酸鈉添加濃度為15mg/L時(shí)產(chǎn)朊假絲酵母具有較好的富

4、硒效果，但一次性添加對(duì)酵母細(xì)胞有較大的毒害作用。采用分批添加亞硒酸鈉的方法獲得了高性能富硒產(chǎn)朊假絲酵母制備的培養(yǎng)條件:發(fā)酵起始添加10mmol/L L-蛋氨酸，并在發(fā)酵過(guò)程的12h、15h分別添加10mg/L和5mg/L亞硒酸鈉。在此培養(yǎng)方式下，產(chǎn)朊假絲酵母胞內(nèi)GSH和有機(jī)硒含量分別達(dá)到172.3 mg/L和1194μg/g。
　　 (2)采用高密度培養(yǎng)的方法制備富硒產(chǎn)朊假絲酵母。補(bǔ)料分批培養(yǎng)在顯著提高酵母細(xì)胞生長(zhǎng)、GSH合成的

5、同時(shí)，也明顯的增強(qiáng)了產(chǎn)朊假絲酵母的富硒性能。首先，考察了恒速流加、指數(shù)流加及多項(xiàng)式流加三種流加策略對(duì)富硒酵母高密度培養(yǎng)的影響，以有機(jī)硒濃度與Se的有機(jī)轉(zhuǎn)化率為指標(biāo)，確定了最佳的流加方式為多項(xiàng)式流加。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步考察了亞硒酸鈉的添加濃度及其添加方式對(duì)富硒產(chǎn)朊假絲酵母高密度制備的影響。結(jié)果表明，較低濃度亞硒酸鈉添加時(shí)雖然Se的轉(zhuǎn)化率較高但有機(jī)硒含量較低，而較高濃度的亞硒酸鈉對(duì)酵母細(xì)胞的生長(zhǎng)、GSH的合成以及Se的有機(jī)轉(zhuǎn)化率都具有不利影

6、響，由此確定了亞硒酸鈉的最佳添加濃度為60mg/L。考慮到亞硒酸鈉的添加方式對(duì)酵母細(xì)胞的富硒效果也會(huì)產(chǎn)生較大的影響，比較了一次性添加、分批添加和連續(xù)流加亞硒酸鈉對(duì)富硒產(chǎn)朊假絲酵母制備的影響。結(jié)果表明，產(chǎn)朊假絲酵母在連續(xù)流加的培養(yǎng)方式下，胞內(nèi)GSH產(chǎn)量及有機(jī)硒含量均達(dá)到最高，分別為687.6mg/L與1143.1μg/g。
　　 (3)研究了富硒產(chǎn)朊假絲酵母對(duì)SD大鼠生理特性的影響。添加一定量的富硒酵母在促進(jìn)SD大鼠生長(zhǎng)的同時(shí)，顯