Resveratrol抑制CD4+T細(xì)胞活化及機(jī)制研究.pdf

1、Resveratrol（白藜蘆醇）又稱芪三酚，化學(xué)名稱為3，5，4′-三羥基二苯乙烯，是蒽醌萜類化合物。其廣泛存在于葡萄科、百合科、豆科等多種植物中。白藜蘆醇具有廣泛的抗腫瘤、抗心血管疾病、抗炎、抗氧化、抗衰老、神經(jīng)系統(tǒng)保護(hù)等作用,它已成為科學(xué)家們高度重視的天然活性成分。本研究中首先我們探討了白藜蘆醇對于CD4+T淋巴細(xì)胞活化的作用影響。體外實驗中通過流式細(xì)胞術(shù)檢測及Brdu細(xì)胞增殖檢測均顯示白藜蘆醇能抑制小鼠脾臟CD4+T細(xì)胞的增殖，

2、且通過用ELISA對細(xì)胞因子(IL-2、IL-4、IL-5、IFN-?)等的分泌檢測顯示白藜蘆醇同樣對細(xì)胞因子的分泌也具有明顯的抑制作用，進(jìn)一步研究表明白藜蘆醇對 T細(xì)胞的凋亡無明顯影響。同時體內(nèi)實驗中我們檢測CIA小鼠血清中IgM及細(xì)胞因子(IL-2、IL-4、IL-5、IFN-?)等的分泌，并用Brdu細(xì)胞增殖檢測白藜蘆醇小鼠脾臟CD4+T細(xì)胞的增殖影響。結(jié)果我們發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇能夠明顯抑制小鼠IgM抗體的產(chǎn)生，對細(xì)胞因子無論是IL-2

3、、IFN-?還是IL-4、IL-5的分泌均具有明顯的抑制作用，且白藜蘆醇能在體內(nèi)抑制CD4+T細(xì)胞的增殖。隨后為進(jìn)一步研究其作用機(jī)制，通過western blot發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇可提高小鼠脾臟T細(xì)胞中sirt1蛋白的表達(dá)量，同時發(fā)現(xiàn)當(dāng)sirt1被下調(diào)后，白藜蘆醇對小鼠脾臟 T淋巴細(xì)胞無明顯的抑制作用。說明白藜蘆醇通過影響Sirt1表達(dá)調(diào)控T細(xì)胞活化。為了進(jìn)一步驗證白藜蘆醇是否影響了sirt1的脫乙酰化活性，我們通過免疫共沉淀方法檢測了下游可

4、能參與其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的核轉(zhuǎn)錄因子C-Jun、NF?B及NFAT等的乙?；?，其結(jié)果顯示白藜蘆醇抑制了核轉(zhuǎn)錄因子C-Jun的乙?；剑珜τ贜F?B及NFAT等的乙?；讲o明顯影響，進(jìn)一步通過免疫熒光染色和共聚焦顯微鏡的觀察發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇能夠抑制核轉(zhuǎn)錄因子C-Jun的核轉(zhuǎn)位。
　　為進(jìn)一步探索白藜蘆醇對于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的潛在治療作用，我們用膠原蛋白免疫DBA1小鼠構(gòu)建CIA動物模型，通過灌胃給予小鼠白藜蘆醇20mg/kg/day，